盘基网柄菌是以二分裂方式进行繁殖的阿米巴类的原生动物,在生存环境不良条件下（如饥饿）,单个分散的盘基网柄菌细胞在cAMP的趋化作用下相互聚集开始多细胞发育。该发育时期要经过细胞聚集、细胞丘、蛞蝓体和子实体四个阶段。在细胞丘阶段,细胞依赖黏附分子（如gp150, gp80, DdCAD-1）的相互作用向中心聚集,形成多细胞组成的丘状结构。其中,gp150异嗜性细胞表面粘附分子对细胞的发育和分化有重要作用。本实验室相关人员对野生型细胞KAx-3和LagC基因（LagC基因编码gp150分子）缺失突变型细胞AK127进行观察并证实了,在细胞丘阶段,野生型细胞KAx-3表达gp150分子,相互紧密结合地进入后聚集阶段,而在突变型细胞AK127中未检测到gp150分子的表达,只能形成盆地样多细胞体,无法完成后期的发育。在gp150对盘基网柄菌的多细胞发育的影响研究过程中,本实验室相关人员筛选到了尿囊酸酶基因,发现它在突变型细胞AK127中表达量极低。尿囊酸酶是生物体内一种嘌呤代谢途径的重要酶,在低等生物体内,可以将尿囊酸彻底分解为NH3和CO2。有研究表明,一定浓度的NH3对阿米巴属的单细胞生物体外的cAMP的浓度有抑制作用,从而影响细胞聚集。本实验以RNAi干扰载体pActl5Gal-allC干扰盘基网柄菌尿囊酸酶基因得到的突变型细胞RNAi-aLLC和野生型细胞KAx-3为实验材料。对液体培养的达到稳定期的盘基网柄菌,进行血球计数板计数发现,稳定期野生型细胞KAx-3和突变型细胞RNAi-allC数目存在明显差异；光学显微镜观察,野生型细胞KAx-3呈圆形,突变型细胞RNAi-allC体积偏小呈椭圆形。本研究提取营养期盘基网柄菌野生型和突变型细胞的总RNA,运用mRNA差异显示法筛选到一条基因差异表达片段。该片段来自突变型细胞RNAi-allC。对差异片段进行切胶回收、cDNA克隆、提取质粒、酶切电泳纯化差异片段、测序、NCBI BLAST比对、Q-PCR对差异基因表达进行实时定量、Northern杂交技术验证假阳性。经测序和NCBI数据库BLAST匕对,该基因片段长度1424bp,与编码白三烯A4水解酶有很高的同源性。经过Northern杂交,该基因片段与突变型细胞RNAi-allC总RNA杂交有信号,与野生型细胞KAx-3没有信号。此外,该差异基因编码的蛋白具有锌金属结构和白三烯A4水解酶（LTA4H）的C端,但该核酸序列与盘基网柄菌已发现的白三烯A4水解酶核酸序列存在着一定的差异,因此,笔者推测,该差异基因编码的蛋白是LTA4H家族中的一个亚型,具有白三烯A4水解酶的功能。白三烯A4水解酶（leukotriene A4hydrolase）是参与花生四烯酸代谢脂肪氧合酶级联反应中的一种锌金属蛋白酶,属于肽酶M1家族。该酶能够水解白三烯A4,生成白三烯B4。白三烯B4是一种有效的趋化因子,能够介导白细胞向炎症中心聚集。同时,在免疫应答反应过程中,能够刺激毛细血管的通透性,导致细胞有丝分裂的发生和淋巴细胞的增殖,这与肿瘤细胞的增殖和癌症发生相关连。与野生型KAx-3细胞相比,突变型细胞RNAi-allC分裂速度快,细胞周期短,形态偏小,表现出与癌细胞相似的特征。因此,笔者推测,该差异片段的表达是导致突变型表现异常的原因之一。