复制、转录和翻译是基本的生命过程,DNA转录生成m RNA,m RNA在核糖体处翻译合成多肽,多肽经折叠修饰变为蛋白质,蛋白质与生化途径和致病机理密切相关,因此分析检测m RNA对研究生命过程和疾病诊断具有重要意义。聚合酶链式反应(PCR)是常用的m RNA检测的方法,但是该检测方法需要逆转录过程,并且不能有效识别单碱基差异,连接酶链式反应(LCR)是一种可以与PCR相媲美的核酸扩增方法,该扩增方法特异性好,能很好的区分单碱基差异,然而LCR的产物需要电泳分离检测,并且以RNA为模板连接DNA探针效率很低。本实验通过使用RNA碱基修饰的DNA探针,成功的实现了以RNA为模板DNA探针的连接,选择适当的检测温度,完成了LCR产物的实时定量检测,从而建立了连接酶链式反应高灵敏度检测信使RNA的方法。这种检测方法不需要逆转录过程,亦不需要LCR产物的分离检测过程,这就简化了操作步骤,节省了检测时间,实验中使用SYBR Green I(SG)为荧光染料,而不是荧光标记的DNA探针,节省了实验成本。另一方面,这种检测方法,具有良好的单碱基分辨能力,可检测到0.1 fmol/L的目标序列,很宽的线性范围,该方法成功应用于总RNA中的目标m RNA检测。在以m RNA为生物指标的研究和疾病诊断中,具有一定的应用价值。