【摘 要】
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原核来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶存在酶活低和自失活的问题,是限制生物法合成β-丙氨酸在工业上应用的主要因素。半胱亚磺酸脱羧酶(cysteine sulfinate decarboxylase,CSAD)不仅可以催化半胱亚磺酸生成牛磺酸,还可以L-天冬氨酸为底物,催化脱去α位羧基生成β-丙氨酸。本课题将研究目光由原核来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶转向真核来源半胱亚磺酸脱羧酶,意在寻找具有更高β-丙氨酸
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原核来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶存在酶活低和自失活的问题,是限制生物法合成β-丙氨酸在工业上应用的主要因素。半胱亚磺酸脱羧酶(cysteine sulfinate decarboxylase,CSAD)不仅可以催化半胱亚磺酸生成牛磺酸,还可以L-天冬氨酸为底物,催化脱去α位羧基生成β-丙氨酸。本课题将研究目光由原核来源L-天冬氨酸-α-脱羧酶转向真核来源半胱亚磺酸脱羧酶,意在寻找具有更高β-丙氨酸催化活性的酶。(1)实现了 AeCSAD在大肠杆菌中的异源表达。确定pET28a为最适表达载体,并通过添
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在大肠杆菌中,补充甜菜碱能上调编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的zwf表达,导致NADPH增加,有利于L-苏氨酸合成。甜菜碱通过proP编码的一种H+-溶酶体合成器ProP或proVWX编码的一种ABC转运器ProVWX进出大肠杆菌。ProP和ProVWX通过运输包括甘氨酸甜菜碱在内的微弱离子渗透体来介导渗透压保护大肠杆菌。大肠杆菌也可以通过betABIT编码的各种酶合成甜菜碱。目前,ProP、ProV
D-阿洛酮糖是一种具有保健功能的稀有糖,在食品、医药等方面发挥着重要作用。本研究将昆虫伯克霍尔德菌(Burkholderia insecticola)来源的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶(D-psicose-3-epimerase,DPE),福氏志贺菌(Shigella flexneri 2a str.301)来源的L-鼠李树胶糖激酶(L-rhamnulose kinase,Rha B)以及苜蓿中华
戊二酸是一种重要的五碳化合物,被广泛应用于塑料化工、医药和农业等领域。与传统的化学合成法相比,以5-氨基戊酸为底物的酶转化法是目前备受关注的戊二酸生物合成法之一。但是其底物价格昂贵,且产量、产率和生产强度并未达到大规模工业化生产的要求。本研究开发了以廉价易得的L-赖氨酸为起始底物,通过多酶级联转化生产戊二酸,并结合RBS调控、蛋白质工程以及转运工程等策略,显著提高了转化L-赖氨酸生产戊二酸的催化效
低分子量β-葡聚糖(Low-molecular-weight β-glucan,LBG)具有独特的生理生化活性,有保湿、防晒、抗氧化、抗菌、促溶解等多种功能,目前主要应用于食品添加、煤炭采集、医药缓释、化妆品构成、农业添加剂等领域,具有良好的应用场景,近年来,国内外对低分子量β-葡聚糖多功能性的研究日趋增多,但是制备研发低分子量β-葡聚糖的方法存在成本高、破坏环境、转化率低等方面的问题。粗甘油是一
先天性糖基化疾病(Congenital disorders of glycosylation,CDG)是一类罕见的遗传性疾病,由编码寡糖链生物合成过程中相关酶的基因缺陷导致。ALG1基因编码的β1,4甘露糖基转移酶Alg1参与内质网寡糖链初始阶段的生物合成,该基因缺陷导致多萜醇寡糖(Dolichol linked oligosaccharides,DLO)无法被顺利的合成,进而影响生命体正常的活动
L-2-氨基丁酸(L-2-ABA)是一种非天然手性氨基酸,是合成几种重要药物的关键手性中间体原料,酰胺化L-2-ABA制备得到的(S)-2-氨基丁酰胺是制备抗癫痫药物左乙拉西坦和布瓦西坦的关键前体,还原L-2-ABA制备得到的(S)-2-氨基丁醇是抗结核药物乙胺丁醇的关键原料。亮氨酸脱氢酶(LDH)被广泛用于制备L-2-ABA,但是中间产物2-酮丁酸(2-OBA)抑制LDH的催化活性导致通路难以继
腐胺(putrescine),又称1,4丁二胺,是一种包含两个氨基的脂肪族胺。广泛应用于医药、农业和工业领域,是一种具有高价值的小分子化合物。腐胺对肠道微生物有重要的调节作用,对采后农作物具有良好的保鲜效果,可用于合成优质工业塑料尼龙-4,6。由于腐胺的生物合成法尚不成熟,本研究尝试采用双酶耦联的方式,以L-精氨酸为底物、大肠杆菌为宿主,全细胞催化以合成腐胺,以期为腐胺的生物合成法作出探索。主要研
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