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LRF（Luman-recruiting factor）也称为Luman/CREB3/LZIP募集因子，是一种蛋白转录因子，属于碱性亮氨酸拉链（L-Zip）蛋白转录因子家族，LRF蛋白共有639个氨基酸（aa）残基，分子量为72ku，研究证明，LRF参与内质网应激中的未折叠蛋白反应，在特别的亚核区募集Luman，该亚核区抑制Luman的转活以及促进蛋白降解从而抑制Luman的作用。但是LRF在生理上的作用机制仍不清楚，因此本实验制备抗LRF单克隆抗体，为后续试验提供技术依据，试验结果如下：1、以pGEX-4T-1为骨架载体，插入LRF-N基因片段，构建了原核表达载体，命名为pGEX-LRF-N。2、优化原核表达GST-LRF-N重组蛋白的条件，试验表明：在37℃，0.1mmol/L的IPTG的终浓度、诱导5h时，重组蛋白的表达效果最好。并用亲和层析法纯化得到了GST-LRF-N重组蛋白。3、GST-LRF-N重组蛋白免疫的血清抗体效价均达到1:4×10~3以上。筛选出最佳的间接ELISA条件。4、用PEG融合剂融合，并用间接ELISA筛选阳性细胞孔，亚克隆后得到三株稳定分泌抗LRF-N蛋白McAb的细胞株（2AC9、2AG10和3G7）。5、2AC9、2AG10和3G7三株单克隆细胞株的细胞上清效价分别为：1:200、1:400、1:400，腹水效价均达到1:10~6；2AC9重链为IgG2a，2AG10重链为IgM，3G7重链为IgG1；亲和常数分别分别约为2×10~5、2×10~5、2×10~6。制备的单克隆抗体为研究LRF蛋白在细胞、组织中的表达，阐明LRF蛋白在机体中的作用机制奠定了基础。