【摘 要】
：
目的:探讨中药单体白术内酯III对心肌梗死小鼠心脏保护作用及对其作用机制的研究。在细胞水平上探究白术内酯Ⅲ对细胞凋亡、炎症及血管生成的影响。方法:通过开胸手术结扎C57BL/6小鼠左冠状动脉构建心肌梗死模型,实验中60只小鼠按照随机的的原则被分为三组:1)假手术组,不对其左冠状动脉进行结扎,进行开胸操作后随即缝合关闭胸腔;2)模型组,进行开胸手术结扎左前降支。3)白术内酯III组,进行开胸手术结扎
论文部分内容阅读
目的:探讨中药单体白术内酯III对心肌梗死小鼠心脏保护作用及对其作用机制的研究。在细胞水平上探究白术内酯Ⅲ对细胞凋亡、炎症及血管生成的影响。方法:通过开胸手术结扎C57BL/6小鼠左冠状动脉构建心肌梗死模型,实验中60只小鼠按照随机的的原则被分为三组:1)假手术组,不对其左冠状动脉进行结扎,进行开胸操作后随即缝合关闭胸腔;2)模型组,进行开胸手术结扎左前降支。3)白术内酯III组,进行开胸手术结扎左前降支。造模前7天给予白术内酯III小鼠按照50mg/kg/天的剂量灌胃白术内酯Ⅲ,假手术组和模型组小鼠则每天给予等量PBS灌胃。到实验截止时间用戊巴比妥钠麻醉各组小鼠,进行M型超声心动图,定量测定小鼠心脏结构和功能。用眼眶静脉丛采血的方法留取各组小鼠的静脉血,检测血清中乳酸脱氢酶含量的变化。留取各组小鼠心脏组织固定后分别进行TTC染色观察各组小鼠心脏梗死区域面积的差异。后续心脏组织切片进行H＆E染色和Masson染色,观察心脏梗死区病理结构变化及纤维化程度。留取小鼠的梗死区域心脏组织分别提取蛋白和m RNA,用Western blot和q RT-PCR检测组织中凋亡和自噬相关分子表达的差异。本课题体外实验部分一共用到了3种细胞进行验证,分别是小鼠心肌细胞（HL-1）、小鼠巨噬细胞（RAW264.7）、血管内皮细胞（HUVEC）。根据实验需要将细胞分为空白对照组、模型对照组、药物处理组（低浓度、中浓度及高浓度）,实验过程中药物处理组给予相应浓度的药物预处理,空白对照组、模型组加等量对照品处理,按照实验需要给予模型对照组和药物处理组相应的刺激处理,空白对照组则给予等量对照液体:1)HL-1和HUVEC给予终浓度为600u M H2O2处理6h;2)RAW264.7给予终浓度为1μg/m L LPS处理6h。按照CCK8试剂、Annexin V-FITC细胞凋亡试剂及活性氧检测试剂说明对细胞进行不同的检测。并且提取不同处理组的RAW264.7的m RNA,用q RT-PCR检测细胞中促炎因子（CCL-2、IL-18及TNF-α）表达的差异。结果:白术内酯III在心肌梗死后发挥心脏保护作用,改善心脏功能,显著增加LVEF和LVFS,减少LVIDD和LVIDS;缩小心脏梗死面积,降低心肌损伤标志物水平;改善心肌梗死小鼠心肌组织病理改变及纤维化程度;此外,白术内酯III可以抑制心肌组织促炎介质的释放来改善心肌梗死小鼠心肌组织炎症反应。同时,白术内酯III抑制梗死部位促凋亡蛋白Bax的表达,上调凋亡保护蛋白Bcl-2的表达来抑制心肌梗死诱导的小鼠心肌细胞凋亡。并且在ATRⅢ在体内可以促进自噬底物泛素结合蛋白P62的表达,逆转beclin1的过表达及LC3BI向LC3BII的过度转化,抑制心脏中的过度自噬过程从而发挥心脏保护作用。细胞研究结果提示白术内酯Ⅲ在细胞水平上能抑制HL-1凋亡,且具有促进细胞增殖的能力;抑制LPS刺激后的RAW264.7细胞炎症因子的释放,降低巨噬细胞炎症反应;促进血管内皮细胞迁移及血管新生。结论:白术内酯III能明显改善心肌梗死小鼠的心脏功能,发挥心脏保护作用。其作用机制是通过抑制炎症反应及心肌细胞凋亡,纠正过度自噬反应来预防心肌梗死损伤。白术内酯Ⅲ能明显改善体外细胞氧化损伤,降低炎症反应,促进细胞迁移及血管生成等。
其他文献
目的:使用干扰素（Interferon,IFN）进行抗病毒治疗可显著提高部分核苷经治的慢性乙型病毒性肝炎（Chronic Hepatitis B,CHB）患者的临床治愈率,且对IFN应答佳的患者血浆外泌体能显著抑制乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus,HBV）的复制,另有研究显示抑制自噬相关基因可以抑制HBV病毒复制。本研究旨在深入探讨干扰素作用下,巨噬细胞外泌体中的微小RNA（Mic
目的骨肉瘤（osteosarcoma,OS）是常见的恶性骨肿瘤之一,多发于青少年和老年人,易转移和复发。目前缺少特定的靶向治疗且容易发生常见化疗药物抵抗,从而导致患者的长期生存率和预后较差。本研究旨在分析环状RNA（circular RNA,circRNA）在OS细胞中的表达情况,通过生物信息学分析其调控miRNA/mRNA的作用机制,进一步探究其在OS中的生物学作用及对甲氨蝶呤化疗敏感性的影响。
目的:构建皮下异位和肝脏原位肝癌移植瘤小鼠模型,检测肝癌免疫微环境中分泌型纤维介素蛋白2（Soluble fibrinogen-like protein 2,s FGL2）对肝癌细胞表面程序性死亡配体1（Programmed cell death ligand 1,PD-L1）、程序性死亡配体2（Programmed cell death ligand 2,PD-L2）和CD4+T细胞、CD8+T
法洛四联症是一种严重的紫绀型先天性心脏病,矫治性手术为针对其有效的治疗方式,但是手术不可避免地带来心肌缺血再灌注损伤。远程缺血预处理,即通过远端肢体或器官的缺血和再灌注,继而产生对靶器官缺血再灌注损伤的保护作用,是一项较好的心保护措施,但是目前其作用机制尚未完全明了。本研究,通过收集1岁以内法洛四联症患儿术中切取的右心室流出道组织,根据是否在术前进行远程缺血预处理将患儿分为远程缺血预处理组和对照组
目的:作为一种由中性粒细胞活化后释放的DNA-组蛋白复合物和多种蛋白质共同组成的网状结构,中性粒细胞胞外诱捕网（Neutrophil extracellular traps,NETs）能够捕获并杀死病原微生物,也可参与机体免疫应答。然而,NETs过度激活或清除受阻可导致其调节失衡,这些病理性的NETs可参与肿瘤的生长和转移,对患者生存及预后造成不良影响。作为主要核酸内切酶之一,DNase I能降解
随着城乡建设的不断深化，住建部发布的城乡建设发展规划中指出，要将科技应用于城乡建设，以促进城乡发展。现阶段的BIM技术发展已相对成熟，在国内建筑工程建设中得到了广泛的应用。文章运用BIM技术分析农村自建房设计与造价方面所存在的问题，并提出解决措施，助力乡村建设。
目的:以“VDR/Nrf2/HO-1”通路为关键点,从动物实验和细胞实验两个方面,验证大黄素通过VDR/Nrf2/HO-1通路保护脓毒症肠屏障损伤的体内外调控机制,旨在从分子层面阐释大黄素保护脓毒症肠黏膜屏障损伤的作用原理,以期为大黄素治疗脓毒症提供科学的理论基础。方法:1、将48只Balb/c小鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、大黄素低（20mg/kg/d）、中（40 mg/kg/d）、高（
背景和目的:肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）在世界范围内是最常见的几个恶性肿瘤之一。每年导致约80万人死亡。然而,HCC的发病机制尚不清楚。肝癌对放疗和化疗并不敏感,其常用的治疗方法包括手术切除、介入治疗、射频消融和肝移植。早期发现、诊断和手术切除是肝癌的主要治疗方法。然而现实中大多数病人发现时已处于疾病后期,错过了手术切除的窗口期,导致治疗效果不理想。因此,分
目的奥氮平是临床上抗精神分裂症的一线用药。但在使用的过程中容易引起胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）等代谢副作用,严重影响患者服药依从性和生活质量。因此探究奥氮平引起IR的机制具有重要意义。方法1)招募服用奥氮平超过三个月发生IR或未发生IR（Non-IR）的患者,分别从两组患者血浆中提取外泌体（IR-exos和Non-IR-exos）并通过电镜、Western Blot、粒
目的:探究绞股蓝皂苷对小鼠心肌缺血再灌注的保护作用及其机制方法:本实验分别构建了心肌细胞氧化损伤模型和小鼠缺血再灌注模型,分别为予以小鼠心房肌细胞系HL-1 600μM的H2O2处理12h和予以C57/B6小鼠冠脉左前降支结扎30min后再灌注手术。体外实验部分绞股蓝皂苷组细胞予以12.5μM和25μM药物预处理12h;体内实验部分绞股蓝皂苷组小鼠予以100mg/kg药物灌胃3d,同模型组造模后继