内皮祖细胞携带KiSS-1基因对鼻咽癌作用的实验研究

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目的:(1)阐明Ki SS-1基因在鼻咽癌侵袭转移中的作用。(2)评价转染Ki SS-1基因的EPCs在鼻咽癌防治中的应用价值。方法:(1)构建含Ki SS-1重组质粒并转染人脐静脉血分离培养的血管内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPCs),获得高表达Ki SS-1基因的稳转细胞(Ki SS-1-EPCs);(2)构建鼻咽癌荷瘤裸鼠模型并通过其尾静脉注入Ki SS-1-EPCs;(3)观察Ki SS-1-EPCs对肿瘤及其转移灶的影响。结果:通过密度梯度离心法和6%羟乙基淀粉沉降法成功从人脐血获得内皮祖细胞,并完成对其培养、传代、扩增和鉴定;完成将Ki SS-1基因转染进人脐血内皮祖细胞,并通过western blot的方法对转染后的内皮祖细胞进行鉴定;建立了稳定的鼻咽癌裸鼠肺转移模型;将转染过Ki SS-1重组质粒的EPCs(Ki SS-1-EPCs)经裸鼠尾静脉注入鼻咽癌裸鼠体内,每只老鼠注入细胞的浓度为2×106/m L,并将其作为实验组;再将未转染过Ki SS-1重组质粒的单纯EPCs,以同等浓度经裸鼠尾静脉注入鼻咽癌裸鼠体内,并将其作为对照组。结果显示,实验组和对照组移植瘤的重量分别为1.385±0.207g,1.474±0.229g,两组数据之间无统计学上的差异(P>0.05),两组肺脏的转移灶生成率分别是5%,30%,具有统计学上的差异(P<0.05),肺脏的转移灶数目分别是19.00,30.02±9.09。结论:本实验建立了稳定的鼻咽癌裸鼠肺转移模型,为鼻咽癌及Ki SS-1基因的研究提供了重要的动物模型。转染Ki SS-1基因的EPCs对鼻咽癌裸鼠模型的肺转移具有抑制作用。
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