【摘 要】
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目的:本研究旨在明确切割人FAK 核酶对胃癌细胞增殖与凋亡的影响,为以FAK 作为肿瘤基因治疗的靶点提供实验材料。方法:设计合成针对FAK 的锤头状核酶的cDNA 序列,定向克隆于
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目的:本研究旨在明确切割人FAK 核酶对胃癌细胞增殖与凋亡的影响,为以FAK 作为肿瘤基因治疗的靶点提供实验材料。方法:设计合成针对FAK 的锤头状核酶的cDNA 序列,定向克隆于逆转录病毒载体内,通过脂质体介导的DNA 转染法,将核酶基因导入SGC-7901 细胞.应用RT-PCR、免疫细胞化学方法检测核酶对SGC-7901细胞中FAK表达的影响;通过MTT 法,TUNEL 法观察核酶对SGC-7901 细胞增殖与凋亡的影响。结果:核酶转染SGC-7901 细胞后,①细胞免疫化学方法检测细胞内FAK蛋白表达明显受抑制;②RT-PCR 半定量检测FAK mRNA 表达水平明显下降。③MTT 法检测细胞增殖活性明显受抑制;④TUNEL 法检测出细胞凋亡,凋亡率为17.5%。结论:核酶基因通过逆转录病毒载体导入SGC-7901 细胞后可成功表达,使细胞FAKmRNA 和FAK 蛋白表达水平下降,并抑制SGC-7901 细胞增殖,同时诱导细胞凋亡。
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