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目的:通过建立测定强直性脊柱炎（AS）患者血清中阿达木单抗（ADL）药物浓度及抗ADL抗体（AAA）水平的免疫分析方法,考察血清中ADL浓度、AAA水平与治疗响应的相关性;探讨早期血清中ADL浓度和AAA水平监测对治疗响应的预测价值。本研究旨在为ADL实施治疗药物监测（TDM）提供依据。方法:临床前瞻性队列研究设计:研究中符合入组标准并签署知情同意书的活动性AS患者,接受标准ADL给药方案治疗（每两周皮下给药一次,每次40 mg）。采集患者给药前及给药后第2、4、8、12、18和24周的谷浓度血样,采用实验室建立的测定人血清中ADL浓度的酶联免疫分析方法测定血药浓度,采用磁珠捕获结合酸解（Bead Extraction and Acid Dissociation Assay,BEAD）的前处理方式纯化血清中的AAA,然后采用直接ELISA的方法检测血清中AAA的水平;分别在给药前及给药后第2、4、8、12、18和24周时评价患者的疗效,获取患者基本信息和疗效评估数据;采用量效关系曲线及受试者特征工作曲线（ROC）考察治疗12周时AS患者血药浓度、AAA水平与治疗响应的相关性,评估早期血药浓度和AAA水平对初始治疗无响应的预测作用。结果:（1）建立了测定人血清中ADL浓度的酶联免疫分析方法,并进行了方法学验证。ADL浓度在20.00～0.63 μg·mL-1的范围内具有较好的浓度-响应关系;药物浓度达到200.00 μg·mL-1时,未发现钩状效应存在;批内和批间变异均小于15%;稀释线性和平行性结果表明该方法稀释线性良好,且与真实样本间具有较好的平行性,符合生物样本分析要求;含药血清经反复冻融及室温和4℃条件下放置5天后保持稳定,适用于临床样本测定。（2）建立了测定人血清中AAA水平的BEAD方法:方法定量范围为10.00～0.31μg·mL-1;使用38个未接受过ADL治疗的样本（来自9个健康人和29个AS患者）确定方法的检测限为0.16 μg·mL-1;当药物浓度分别为0.00,1.00,10.00和50.00μg·mL-1时,低、中和高3个AAA质控浓度水平(0.50、1.00和5.00μg·mL-1)的回收率均在80%～120%的范围内,方法对药物干扰的耐受程度可达50.00 μg.mL-1;方法对肿瘤坏死因子α（TNF-α）干扰的耐受浓度为500.00ng·ml-1,远高于生理水平药物靶标浓度;方法准确度和精密度均小于15%;稀释线性、和钩状效应考察结果满足方法学要求,可用于生物样本测定。（3）血药浓度与治疗响应的相关性:共入组32例患者。血药浓度与疾病活动度改善（△ASDAS）间存在明显的量效关系,血药浓度在8.00～12.00μg.mL-1范围内有望获得最佳疗效;初始治疗响应组患者血药浓度显著高于治疗无响应组患者（p=0.002）;ROC分析结果表明,当血药浓度低于9.49 时,可准确预测初始治疗无响应（AUC=0.820,灵敏度为76.9%,特异性为78.9%,p=0.0001）。（4）AAA水平与血药浓度和治疗响应的相关性:随着用药时间延长,AAA 阳性率逐渐升高,用药4周时AAA 阳性率为62%（18/29）,用药至12周时AAA阳性率为72%（21/29）,且各评价时间点AAA 阳性患者血药浓度显著低于AAA阴性患者（p=0.001）;相关性分析结果显示,12周时AAA水平与血药浓度呈现显著的负相关（Spearman r=-0.8373,p<0.0001）;初始治疗响应组患者AAA水平低于治疗无响应组患者,但未显示统计学差异（p=0.052）;当AAA水平高于0.59 μg·mL-1-eq,可以准确预测初始治疗无响应（AUC=0.710,灵敏度为83.3%,特异性为58.8%,p=0.036）。（5）早期血药浓度、AAA水平与治疗响应的相关性:初始治疗响应组患者4周血药浓度显著高于治疗无响应组患者（p=0.0002）,ROC分析结果表明,当4周血药浓度低于3.66 μg.mL-1时,判断患者治疗无响应的准确度较高（AUC=0.900,灵敏度为84.6%,特异性为94.7%,p<0.0001）;初始治疗响应组患者2周血药浓度显著高于治疗无响应组患者（p=0.036）,ROC分析结果显示,当2周ADL浓度低于3.34μg.mL-1时,可以准确预测初始治疗无响应（AUC=0.880,灵敏度为100%,特异性为70%,p=0.0002）;4周AAA水平在初始治疗无响应组患者中显著高于治疗响应组（p=0.011）,且当AAA水平高于2.18 μg·mL-1-eq时,可准确区分治疗无响应的患者（AUC=0.780,灵敏度为75%,特异性为82.4%,p=0.003）。结论:（1）本文建立了测定人血清中ADL和AAA浓度的免疫分析方法,具有较好的稳定性和适用性,可用于AS患者血清中ADL和AAA浓度水平的测定;（2）AS患者血药浓度、AAA水平与治疗响应间存在显著的相关性,可为以TDM为基础的用药方案调整提供依据;（3）早期ADL和AAA浓度监测有助于针对药物暴露水平不足的患者进行用药调整,降低初始治疗无响应的发生率。