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本文第一章进行了三氧化二砷体外诱导人胆管癌细胞株凋亡的实验。研究了三氧化二砷体外诱导人类胆管癌细胞株QBC939、RBE凋亡。研究采用噻唑兰比色实验(MTT)观察三氧化二砷对胆管癌细胞株QBC939、RBE生长抑制作用;光学显微镜、荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变;DNA凝胶电泳观察凋亡细胞DNA片断化;流式细胞仪检测凋亡率和细胞生长周期改变。
本文第二章介绍了Bcl-2/Bax、TRAIL/TRAIL-R在三氧化二砷诱导人胆管细胞株凋亡中的作用。研究Bcl-2、Bax、TRAIL及其受体TRAIL-R1和TRAIL-R2在三氧化二砷诱导人类胆管癌株QBC939、RBE细胞凋亡中的作用。测定了Rhodamine123染色检测线粒体膜通透性变化;RT-PCR检测Bcl-2、BaxmRNA的表达;RT-PCR检测TRAIL及其受体TRAIL-R1和TRAIL-R2mRNA的表达。
结论为三氧化二砷可以改变线粒体膜的通透性,下调胆管癌细胞株QBC939、RBE的Bcl-2mRNA表达,上调BaxmRNA的表达,提示可能启动了线粒体凋亡信号传导途径;三氧化二砷可以上调TRAILmRNA及其受体TRAIL-R1、TRAIL-R2mRNA的表达,提示可能启动了死亡受体凋亡信号传导途径。因此,推测三氧化二砷可能通过多种途径诱导胆管癌细胞凋亡。