选题依据:黄芪药材市场需求量极大。目前,市场上主要以山西仿野生芪与甘肃栽培芪为主。山西仿野生芪为我国优质道地药材,业内认同度远高于甘肃栽培芪。仿野生黄芪作为优质黄芪规格,已被中华中医药学会团体标准收载(标准编号:T/CACM 1021.4-2018),但该标准中仅有性状标准,缺乏化学成分标准。2015版《中国药典》的合格标准在化学指标方面不能体现这一优质规格商品特色。主要表现在:(1)、两类黄芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷(≥0.02%)和黄芪甲苷(≥0.04%)含量限度无差异。(2)、无指纹图谱或特征图谱鉴别两类黄芪。基于此,本文将规格等级与化学评价相结合,从化学表观成分寻找两类黄芪药材差异,并建立黄芪黄酮类特征图谱来区分两类黄芪。建立仿野生黄芪药材质量标准,促进黄芪市场优质优价。目的:通过测定不同规格等级黄芪药材中化学成分含量及特征图谱研究,建立高出《中国药典》的山西仿野生黄芪药材质量标准。方法:(1)采用2015版《中国药典》黄芪项下毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量测定方法测定山西仿野生芪与甘肃栽培芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,运用数理统计方法ROC曲线(受试者工作曲线)寻找两类黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量限度临界值;(2)改进2015版《中国药典》黄芪项下黄芪甲苷样品前处理方法,并采用改进方法测定山西仿野生芪与甘肃栽培芪黄芪甲苷含量,比较两类黄芪药材黄芪甲苷含量差异;(3)利用HPLC-UV结合相似度评价软件、聚类分析、多元统计分析建立黄芪黄酮类特征图谱;(4)采用吹扫捕集-气质联用技术建立黄芪药材正己醛含量测定方法,比较山西仿野生芪与甘肃栽培芪正己醛含量差异。结果:(1)通过测定45批共225个山西仿野生芪样本与42批共210个甘肃栽培芪样本毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,结果发现山西仿野生芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量均值为0.107%,为甘肃栽培芪的3倍(甘肃栽培芪均值为0.037%),为该类芪的优质成分。ROC曲线分析结果将山西仿野生芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量限度提高到0.069%。通过测定黄芪饮片毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量验证ROC曲线判定结果准确度为93%,说明判定结果准确。此结果为制定优质药材标准提供依据。等级分析结果显示山西仿野生芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量高低依次为一等、特等、二等、三等、四等。特等并不是含量最高的,原因是特等黄芪药材生长年限较长,中心木质部分腐朽程度较高。甘肃栽培芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量与等级无规律。(2)黄芪甲苷改进方法在样品前处理中不仅避免了耗材质量不稳定导致回收率不高问题,而且测定值高于药典方法,具有节省时间、重现性好等特点。ROC曲线分析结果说明山西仿野生芪二等、三等、四等黄芪甲苷含量明显高于甘肃栽培芪(山西仿野生芪含量限度可提高到0.082%),而山西仿野生芪特等、一等黄芪甲苷含量与甘肃栽培芪无显著性差异。若将黄芪甲苷含量限度提高到0.082%,山西仿野生芪特等、一等黄芪甲苷含量不合格,故本文不对仿野生芪黄芪甲苷含量限度进行修订。等级比较结果显示山西仿野生芪黄芪甲苷含量与等级呈显著负相关,而甘肃栽培芪黄芪甲苷含量与等级不呈相关性。(3)黄芪药材特征图谱研究结果:建立以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷等五种黄酮类成分为主的HPLC-UV黄芪特征图谱,以山西仿野生芪特征图谱为对照,进行相似度、主成分分析、聚类分析,结果显示山西仿野生芪样品相似度为0.892~0.994,甘肃栽培芪样品相似度为0.274~0.531,山西仿野生芪一致性较高,甘肃栽培芪一致性较差,且聚类分析结果与主成分分析结果显示山西仿野生芪与甘肃栽培芪可明显区分。山西仿野生芪不同等级药材区分明显,甘肃栽培芪不同等级药材区分不明显。(4)正己醛含量测定结果:采用吹扫捕集技术建立的正己醛含量测定方法稳定、高效。仿野生芪挥发性成分正己醛含量显著高于甘肃栽培芪。不同等级黄芪正己醛含量无明显规律。结论:本研究测定大量山西仿野生芪与甘肃栽培芪样品,在2015版《中国药典》基础上将山西仿野生芪毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量限度提升到0.069%,可明显区分两类黄芪药材。改进的黄芪甲苷样品前处理方法简单、高效,可明显提高黄芪甲苷含量。建立的黄芪黄酮类特征图谱可明显区分山西仿野生芪与甘肃栽培芪。因正己醛挥发性成分不稳定,故不收载入标准,当存储年限确定时,正己醛可作为参考性指标评价两类黄芪。建立的仿野生黄芪药材质量标准可以促进市场优质优价。