茶叶水提物抗皮肤光老化的作用及机理研究

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目的:证实茶叶水提物对皮肤光老化具有防治作用,并对其作用机理进行研究。方法:以四种茶叶水提物(黄金茶、白毫银针、信阳毛尖、信阳红)为材料,对其主要化学成分进行了测定,探讨其对皮肤光老化的防治作用;本文通过中波紫外线(UVB)诱导人表皮角质形成细胞(HaCaT)和小鼠成纤维细胞(L929)细胞损伤建立体外光老化模型,以细胞活性、SOD、GSH-Px、LDH活力、MDA、 ROS、Hyp含量为指标,研究茶叶水提物对皮肤光老化的预防和治疗作用;以ICR小鼠为实验对象,构建了慢性光损伤模型,并采用外涂方式作用于光老化小鼠皮肤,观察其组织形态学、SOD、GSH-Px活力、MDA、Hyp含量变化,应用酶联免疫法(ELISA法)检测小鼠皮肤匀浆液中MMP-1、MMP-3和TNF-α含量变化,对小鼠皮肤组织进行RNA抽提,检测MMP-1mRNA、MMP-3mRNA和TNF-αmRNA的表达,以研究茶叶水提物对皮肤光老化的防护作用及机制。结果:①4种茶叶水提物中,茶多酚含量最高,其次是游离氨基酸含量、生物碱含量。游离氨基酸含量波动范围为11.87%-14.56%;茶多酚含量差异较大,在31.956%-70.65%范围内波动;生物碱中含量最高的为咖啡碱,但4种茶叶水提物中,咖啡碱含量差异不大,在9.68%-11.07%范围内波动。②茶叶水提物能明显提高UVB光损伤HaCaT及L929细胞活性,降低细胞内部ROS含量,提高细胞培养液中SOD、GSH-Px活力和Hyp含量,降低培养液中MDA含量及LDH活性。③外涂茶叶水提物后,能够明显改善小鼠皮肤组织老化症状,小鼠背部皮肤颜色浅,脱屑少,小鼠表皮层增厚幅度小,少见真皮层纤维组织断裂、破碎,胶原纤维边缘离散现象得到改善,并提高小鼠背部皮肤组织中SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量,增高Hyp含量,降低小鼠皮肤组织中MMP-1、 MMP-3及TNF-α分泌量,且其mRNA表达量也有所下调,有效降低皮肤光老化产生的相关基因的表达。结论:茶叶水提物对UVB致HaCaT、L929细胞光损伤均具有保护作用。并对慢性光老化模型小鼠皮肤具有防治作用。推测其机制与清除氧自由基,提高抗氧化酶活力,降低脂质过氧化损伤程度,保护细胞膜的结构和功能的完整性,抑制基质金属蛋白酶和肿瘤坏死因子的异常分泌,减少胶原蛋白降解或促进其合成有关。本实验对茶叶水提物抗皮肤光老化作用及其机制进行了研究,为茶叶应用于预防和延缓皮肤光老化提供了理论依据。
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