【摘 要】
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目的 确定阳离子脂质体为载体的反义ODNs转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的最佳转染效率及对细胞的毒性作用。方法 人工合成反义ODNs,并经全程硫代磷酸化修饰及荧光素FAM标记。分别
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目的 确定阳离子脂质体为载体的反义ODNs转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的最佳转染效率及对细胞的毒性作用。方法 人工合成反义ODNs,并经全程硫代磷酸化修饰及荧光素FAM标记。分别将有/无脂质体介导的反义ODNs转染小鼠乳腺癌TM40D细胞,应用流式细胞仪观察不同时间的反义ODNs的转染效率,以正常培养的细胞做阴性对照。通过荧光显微镜观察反义ODNs在细胞内的分布。通过全自动生化分析仪检测转染培养上清液的乳酸脱氢酶量。结果(1)无脂质体介导的反义ODNs转染细胞1h阳性率为30.06%,随着时间的延长而转染效率增加,6h时达到63%。脂质体介导的反义ODNs转染细胞1h阳性率为50.23%,2h时为51.13%,4h时转染效率达到高峰为72.23%,6h时维持在高水平71.13%。(2)细胞内荧光强度无脂质体介导组随着时间的延长而增加,脂质体介导组在4h达到高峰。这与细胞转染效率相关。(3)无脂质体介导的FAM标记的反义ODNs分布在细胞浆,脂质体介导的反义ODNs在细胞浆及细胞核内均有分布。(4)各组LDH浓度无统计学差异。结论(1)脂质体介导组反义ODNs
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