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分子印迹技术因其构效的预定性,对目标物质具有选择性而被广泛的用于离子、小分子和大分子蛋白质的检测。在众多合成印迹聚合物的方法中,溶胶?凝胶法和表面印迹技术因其显著的优势被广泛的应用。利用溶胶?凝胶法合成的多孔材料物理强度较高,具有良好的耐用性,且制备的方法简单,能在温度较低的制备,大大降低了温度对蛋白质活性的影响,有利于对蛋白质的印迹。利用表面印迹技术来合成印迹聚合物,且其识别位点位于或接近于印迹聚合物的表面,有效地避免了因包埋过深而造成的模板分子不易洗脱和泄露的问题,可以减小迁移阻力,加速模板分子的结合动力学过程,有利于模板分子的洗脱,可提高了对目标物的检测效率。荧光传感技术检测灵敏度响高、分析速度快,广泛用于各个生物分析中。其中比率荧光传感体系,引入参比物质作为对照,相比于单荧光发射峰体系,可以有效的降低外部因素造成的干扰,提高测试结果的准确度。本论文利用比率荧光传感体系来检测卵清蛋白、牛血红蛋白和Cu(Ⅱ)离子。1.异硫氰酸荧光素后修饰卵清蛋白分子印迹聚合物的制备及其对卵清蛋白的检测该工作分两步进行,首先利用溶胶?凝胶法合成了卵清蛋白(OVA)分子印迹聚合物,然后在聚合物的表面后修饰上异硫氰酸荧光素(FITC)。采用后修饰的方法,反应条件温和,有利于保护卵清蛋白的活性,而且加强了FITC对卵清蛋白的敏感程度。最后按合适的比例加入参比物质(碳量子点)构造比率荧光传感体系。由于OVA具有疏水区域,可以改变FITC周围的环境,使其荧光强度发生改变,合成的印迹材料对卵清蛋白有特异性识别位点,可以实现对OVA的识别。在该传感体系中加入卵清蛋白溶液后,位于520 nm处MIP@FITC的荧光发射峰的荧光强度增强,而位于454 nm处碳量子点的荧光峰的强度几乎不变。在0.05~2μmol/L的浓度范围内,卵清蛋白浓度与两峰的荧光强度比值呈现良好的线性关系,线性相关系数为0.9972。在紫外灯下试纸条的颜色,随卵清蛋白浓度也呈现出由蓝色到绿色的变化。该体系的检测限可为15 nmol/L,印迹因子为2.5,将其用于人尿的实际样品的检测实验中,回收率在92~104%之间,相对标准偏差在3.3~3.9%的范围内,该体系对卵清蛋白的具有良好的选择性和实际应用前景。2.含双荧光发射峰的牛血红蛋白印迹聚合物的制备及对牛血红蛋白的检测构建了一种以复合荧光材料为比率荧光信号的印迹聚合物体系。首先将发红色荧光的碲化镉量子点进行包硅处理并外接APTES,使其由带负电荷变为带正电荷,然后通过静电作用枝接在发蓝色荧光的石墨烯表面,构建了具有双荧光发射峰的复合荧光材料。利用溶胶-凝胶法,以复合的荧光纳米材料为基底,制备了牛血红蛋白分子印迹聚合物(BHb-MIPs)。由于含有大量与牛血红蛋白在大小、形状、官能团上相匹配的特异性识别位点,并且这些识别位点位于或接近于印迹聚合物的表面,因此BHb-MIPs可以对牛血红蛋白实现快速、高效的检测。当加入不同浓度的牛血红蛋白溶液后,位于660 nm处的荧光发射峰的荧光强度被有规律的猝灭,而位于460 nm处荧光峰的荧光强度波动不大,牛血红蛋白的浓度与两荧光峰荧光强度的比值在0.05~4μmol/L的范围内呈现良好的线性关系,检测限为25 nmol/L。在紫外灯下溶液的颜色呈现出由红色到蓝色的明显变化。该体系对牛血红蛋白的检测具有良好的选择性,且在人尿实际样品的检测实验中展现了良好的应用前景,相对标准偏差位于3.1~4.2%的范围内,回收率可达到95.4~101%。3.L-半胱氨酸和6-巯基烟酸修饰的ZnS:Mn(Ⅱ)量子点的制备及其对铜离子(Ⅱ)的检测首先合成了掺锰的ZnS量子点(ZnS:Mn(Ⅱ)QDs),然后用L-半胱氨酸(L-Cys)和6-巯基烟酸(MNA)对量子点进行了修饰,制备出一种新型的纳米粒子荧光探针MNA-L-Cys-ZnS:Mn(Ⅱ)QDs,具有良好的分散稳定性,它们可以通过Cu(Ⅱ)-S键与Cu(Ⅱ)离子发生作用,以电子传递机制导致量子点的荧光猝灭。在325 nm的激发波长下,MNA-L-Cys-ZnS:Mn(Ⅱ)QDs含有两个荧光发射峰,分别是位于593 nm处的红色荧光发射峰和位于412 nm处的蓝色荧光发射峰。随着加入的Cu(Ⅱ)离子溶液浓度的增加,593 nm处的荧光发射峰的荧光强度下降,而412 nm处的荧光发射峰的荧光强度基本不受影响。在紫外灯下溶液的荧光颜色发生了容易分辨的颜色变化,从橘红色到紫色。探针对Cu(Ⅱ)离子具有良好的选择性。593 nm和412nm处荧光峰的荧光强度比值与Cu(Ⅱ)离子浓度在5~500 nm的范围内呈线性关系,检测限为1.2 nmol/L。