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法尼酯衍生物X受体(farnesoid X receptor,FXR)是重要的孤儿核受体之一,主要在肝脏中表达。由于生理水平的胆汁酸是FXR的内源性配体,因此FXR对胆汁酸和胆固醇稳态有重要的调节作用。控制胆汁酸的合成和转运,防止肝细胞内胆汁酸的过度堆积可改善和治疗与胆汁酸代谢相关疾病。
在正常生理状态下,FXR可通过与靶基因启动子上的FXR反应元件的结合,使一系列参与调节胆汁酸和胆固醇代谢的基因发生表达变化,从而影响机体的胆汁酸和胆固醇代谢。随着FXR内源性配体和FXR分子结构与功能研究进展,人们发现FXR的激动剂和拮抗剂可通过干预胆汁酸的合成、转运和吸收,治疗胆汁淤积性肝病。目前已知的FXR有效内源性配体有:鹅脱氧胆酸(chenodeoxycholic acid,CDCA)、石胆酸(lithocholicacid,LCA)、脱氧胆酸(desoxycholic acid,DCA)和胆酸(cholic acid,CA),而又以CDCA激活作用最明显。
阻塞性黄疸(简称阻黄)是由肝内、外胆管的机械性损伤使胆汁酸在肝内瘀积所导致的全身多系统临床病症。阻黄时,由于胆汁酸不能排出肠道,使正常胆汁酸肝肠循环受阻,血清中胆汁酸含量升高,刺激FXR表达上调。近来发现,胆道阻塞后,随阻塞时间的延长,FXR表达减弱。因此,研究胆道阻塞后肝脏中的FXR基因表达,搞清胆道阻塞过程与FXR表达的变化关系,对阻塞性黄疸的临床治疗具有十分重要的意义。
目的:探讨应用FXR药物治疗肝胆疾病的可行性,证明FXR作为治疗阻塞性黄疸疾病的新型药物靶点,发现FXR靶基因的新型激动剂,为治疗胆汁淤积性疾病奠定了实验基础。
方法:通过建立大鼠胆管阻塞模型,观察大鼠胆管阻塞1d、3d、7d和14d四个时段的肝脏组织形态学改变;检测这四个不同时段的大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB)和总胆汁酸(TBA)等血液生化指标;通过免疫组化方法观察大鼠胆管阻塞不同时段的FXR表达变化,同时利用上述方法研究CDCA在大鼠胆管阻塞进程中的作用。
结果:大鼠胆管阻塞后,随时间延长肝内血管充血,细胞肿胀变性;肝内胆管扩张,纤维组织增生,但14d后症状有所缓解;随大鼠胆管阻塞时间延长,血清中ALT(858.55±299.02,928.57±349.24,1031.58±354.08,986.17±34.22)、AST(354.56.±99.10,381.62±148.89,438.67±107.87,294.59±17.83)、ALP(557.33±41.86,673.33±18.27,868.42±177.60,795.83±73.37)、TB(106.67±59.46,133.58±17.69,147.13±22.59,135.87±6.53)和TBA(92.33±42.89,184.68±37.67,277.58±35.87,253.85±20.06)明显升高。第7d达到峰值,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05),第14d后均明显下降;CDCA可不同程度的降低大鼠血清中ALT(745.32±177.10、839.94±48.40、934.54±22.81、873.17±31.15)、AST(312.83±77.33、356.54±84.54、430.35±50.01、192.64±34.52)、ALP(466.83±48.57、551.69±36.78、648.38±65.47、587.23±58.46)、TB(79.42±12.54、100.55±45.12、107.33±57.48、112.65±33.06)和TBA(63.55±8.12、124.61±32.41、154.35±5.52、156.05±22.02)的水平。另外,随大鼠胆管阻塞时间的延长,FXR表达上调,第7d最为明显。CDCA治疗可明显减轻大鼠胆管阻塞后所致的肝脏损伤,CDCA可抑制FXR的表达上调。
结论:胆管阻塞可导致肝损伤和肝纤维化,其程度和血清中的ALT和AST水平呈密切相关。胆道阻塞时,胆汁酸浓度的上升刺激FXR表达上调,并随阻塞时间延长,FXR蛋白表达增高相对缓慢。FXR的激动剂-CDCA可减轻胆道阻塞后大鼠肝脏损害。