论文部分内容阅读
目的:肥胖是2型糖尿病的重要诱因,促进2型糖尿病的发生发展,并诱发胰岛素靶组织的慢性低度炎症,但胰岛素抵抗和炎症发生发展的机制未完全阐明。诱导型一氧化氮合酶iNOS与多种疾病有关,本研究用高脂饲料诱发野生型（WT）小鼠和iNOS-/-小鼠胰岛素抵抗,探讨iNOS对胰岛素抵抗的影响。方法:第一部分:用普通饲料和高脂饲料分别喂养WT小鼠12周后,Real-time PCR检测胰岛素靶组织骨骼肌、肝脏、附睾脂肪的iNOS mRNA水平。第二部分:用普通饲料和高脂饲料分别喂养WT小鼠和iNOS-/-小鼠,分为普通饮食（Chow）野生型（WT）小鼠组、普通饮食（Chow）iNOS-/-小鼠组、高脂饮食（HFD）野生型（WT）小鼠组、高脂饮食（HFD）iNOS-/-小鼠组,四组小鼠每组随机分为两组,其中一组注射胰岛素。未注射胰岛素的四组小鼠测量体重、摄食量、空腹血糖,进行GTT、ITT实验,断颈处死小鼠后取小腿腓肠肌、肝脏、附睾脂肪,包埋部分组织,称取肝脏和附睾脂肪重量。组织切片油红O染色,检测骨骼肌脂质异位沉积。Western Blot检测p-IRS1 S307。胰岛素刺激的四组小鼠,Western Blot检测胰岛素信号通路p-Akt S473。第三部分:用普通饲料和高脂饲料分别喂养WT小鼠和iNOS-/-小鼠,分为Chow WT小鼠组、Chow iNOS-/-小鼠组、HFD WT小鼠组、HFD iNOS-/-小鼠组,Western Blot检测四组小鼠小腿腓肠肌、肝脏、附睾脂肪组织中的p-NF-κB p65、p-IKKα/β、p-JNK T183/Y185。结果:第一部分结果显示:HFD WT小鼠胰岛素抵抗后,iNOS mRNA在胰岛素靶组织中显著增加。第二部分结果显示:与Chow WT组小鼠相比,HFD WT小鼠组体重、附睾脂肪重量、肝重、p-IRS1 S307显著增加、糖耐量受损、胰岛素敏感性受损、骨骼肌脂质异位沉积加重。HFD WT小鼠比Chow WT小鼠胰岛素靶组织的p-Akt S473显著降低。与HFD WT小鼠组相比,HFD iNOS-/-小鼠组体重、附睾脂肪重量、肝重、p-IRS1 S307显著降低、糖耐量改善、胰岛素敏感性改善、骨骼肌脂质异位沉积减轻。HFD iNOS-/-小鼠比HFD WT小鼠p-Akt S473显著增加。提示iNOS通过胰岛素信号通路调控糖脂代谢。第三部分结果显示:HFD WT小鼠组的小腿腓肠肌、肝脏、附睾脂肪p-NF-κB p65、p-IKKα/β、p-JNK T183/Y185显著高于Chow WT小鼠组。HFD iNOS-/-小鼠小腿腓肠肌、肝脏、附睾脂肪p-JNK T183/Y185均低于Chow WT小鼠组。与HFD WT小鼠组相比,HFD iNOS-/-小鼠组小腿腓肠肌、附睾脂肪p-NF-κB p65、p-IKKα/β无显著变化。与HFD WT组相比,HFD iNOS-/-小鼠肝脏p-NF-κB p65、p-IKKα/β显著降低,提示iNOS的表达影响NF-κB和JNK信号通路。结论:1.高脂饮食（HFD）升高骨骼肌、肝脏、附睾脂肪中iNOS mRNA表达。2.iNOS通过调控胰岛素信号通路影响糖脂代谢。3.iNOS影响NF-κB和JNK信号通路。