3种卷柏属药用植物抗肿瘤作用的实验研究

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目的:探索卷柏属3种药用植物中黄酮类化合物的抗肿瘤作用,并阐明其作用机理。方法:体外培养肺癌A549,肝癌Bel-7402和结肠癌HT-29三种人类癌细胞,将卷柏属药用植物的不同提取物作用于癌细胞。(1)通过倒置显微镜对各药物组作用后细胞的形态改变进行观察;(2)应用MTT法计算出各种药物不同浓度、不同作用时间对3种癌细胞生长的抑制率,分析其对细胞增殖的影响;(3)用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。(4)采用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptionpolymerase chain reation,RT-PCR)法检测COX-2的mRNA水平,用电泳凝胶成像自动分析系统检测各扩增带的产物含量,用下列公式表示:灰度值=COX-2mRNA密度/β-actin mRNA密度。结果:卷柏属药用植物7种活性成分和活性部位作用于肿瘤细胞后,光镜下可见癌细胞出现凋亡的形态改变。细叶卷柏中5种(组)双黄酮类化合物对3种癌细胞系有显著抑制作用,并能诱导这些肿瘤细胞的凋亡,其抑制作用与时间、浓度呈正相关。翠云草总黄酮和江南卷柏总黄酮可以在mRNA水平上抑制COX-2的表达。结论:发现了细叶卷柏中5种双黄酮类化合物可抑制3种肿瘤细胞的生长,流式细胞术检测进一步证实诱导细胞凋亡是其抗癌机制之一。COX-2在各肿瘤组织中都有较高的表达,翠云草总黄酮和江南卷柏总黄酮能在mRNA水平上抑制COX-2,进而抑制COX-2蛋白质表达,降低PGE2产量,可能是这两种药用植物抗肿瘤作用的机制之一。本研究为卷柏属药用植物黄酮类提取物用于癌证治疗提供了一定的理论依据,将有助于拓展卷柏的药用价值。
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