自20世纪50年代，Blaxter首次成功冰冻保存了太平洋鲱鱼(Clupea harengus)精巢后，到目前为止，种质资源的超低温冷冻保存技术已经取得了不错的成绩，并正日益趋于成熟。目前，已对200多种淡水鱼类、40多种海水鱼类的精液作了冷冻保存研究，并获得了成功保存，并建立了精子冷冻库(cryobank)。但目前还尚未取得一个统一的方法适用于各种鱼类，因此，鱼类精液冷冻保存技术还有待需要进一步的探索和推进。同时期，鱼类胚胎冷冻保存也开始了相关研究。随着生物技术和新型技术手段的不断成熟和应用，鱼类胚胎冷冻保存研究的发展也取得了迅速的推进。星斑川鲽(Platichthys stellatus, Pallas1788)隶属鲽形目(Pleuronectiformes)、鲽科(Pleuronectidae)、川鲽(Platichthys)属。主要分布于白令海峡、楚科奇海、阿拉斯加和加拿大北部沿海以及北美和南加利福尼亚等，其中，在加拿大、美国、俄罗斯、中国、朝鲜、韩国和日本等均有分布。但近些年，星斑川鲽的自然种群在我国已很少发现，并且星斑川鲽产精量少，限制了在人工繁育和杂交育种中的扩大生产。石斑鱼为雌雄同体，暖水性海水鱼类，以热带、亚热带分布居多，在我国主要分布于南海和东海。鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)和七带石斑鱼(Epinephelus septemfasciatus)隶属鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranidae)、石斑鱼亚科(Epinephelinae)、石斑鱼属(Epinephelus)。鞍带石斑鱼体型大、生长迅速，是水产养殖业的新型品种，但其雄鱼数量少，产精量有限，这些因素的限制造成现实不能够满足实际的需求。此外，生殖隔离也阻隔了石斑鱼种间杂交的发展。七带石斑鱼是在我国黄海唯一有分布的、具有较高经济价值的种类。本实验室于2013年已对七带石斑鱼精子进行了冷冻保存，并获得了成功。目前，由于七带石斑鱼因神经坏死病的复发蔓延，该鱼产量受到了严重影响。为此，鉴于以上几种鱼类所存在的问题，开展鱼类种质保存研究是解决和保持水产养殖业可持续发展和保护鱼类遗传多样性的一种可行性方法，并且该研究的开展已迫在眉睫，势在必行。本研究分别对星斑川鲽和鞍带石斑鱼两种海水鱼类的精子进行了冷冻保存，在星斑川鲽精子冷冻保存研究中，主要对精子稀释液(种类、成分、渗透压)、激活海水适宜温度，冷冻精液的适宜稀释比例等方面进行了筛选。研究得出，利用Ts-2和SFs-4作为稀释液，10%DMSO为抗冻剂，冷冻复苏后用12℃海水激活能够获得较高的精子活力，并且利用稀释20倍的冻精用于受精实验，能够获得较高的受精率。此外，运用CASA系统对利用Ts-2和SFs-4冷冻保存的精子做了参数分析，发现利用SFs-4保存的精子各项运动参数明显高于Ts-2。在鞍带石斑鱼精子冷冻保存研究中，主要对精子稀释液种类、抗冻剂DMSO及FBS适宜浓度作了筛选。结果得出，利用ELS3和ELRS3作为稀释液，15%DMSO和10%FBS作为抗冻剂，精子的冷冻效果最好，解冻复苏后精子活力最高。同时，本研究对七带石斑鱼胚胎进行了超低温玻璃化冷冻保存，主要是从抗冻剂种类以及不同种类抗冻剂混合搭配使用对胚胎的毒性作用大小的角度，来筛选出毒性最低的最适宜的玻璃化液用于冷冻保存。研究结果发现利用35%PMG3+5%海藻糖(PMG3T)玻璃化液处理的未经冷冻的胚胎的孵化率最高为31.76%，并经冷冻保存后，发现78粒冷冻保存的卵中，解冻处理后有上浮卵6粒，并有1粒孵化出仔鱼。此外，本研究还对利用PM、PMG3、PMG3T3玻璃化液处理和冷冻保存的七带石斑鱼肌节期胚胎内的6种酶进行了测定，发现鉴于玻璃化液处理和冷冻保存后的胚胎内6种酶活性，除了MDA外，其他5种酶(SOD、CK、Na+/K+-ATPase、LDH、GSH-Px)活性均减少，表明冷冻和玻璃化液均使得胚胎细胞内的抗氧化体系遭受损伤，造成胞内能量代谢酶和某些抗氧化酶含量减少，脂质过氧化损伤等，从而降低了冷冻胚胎复活率。通过对冷冻前后胚胎内相关酶活性的测定，一定程度上为七带石斑鱼胚胎冷冻保存提供了理论依据。另外，为了更好的探索海水鱼类胚胎冷冻保存机理，本文对海水靑鳉胚胎进行了初步的研究实验，但目前尚未作出系统的研究工作，还有待日后继续进行研究。