低能离子注入黄曲霉甾体转化株诱变选育色素突变体的研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:aoli668
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
在现代生物医药产业中,甾体类化合物的生物修饰是生物转化技术的热点领域之一,有着巨大的经济效益和社会效益。本研究涉及的黄曲霉甾体转化株,具有很强的甾体C11位α-羟基化能力,但是该菌种在发酵的过程中会产生一种红色色素,用常规的方法难以去除,从而影响到产物的分离与纯化。本研究利用低能离子对黄曲霉甾体转化株进行诱变,研究了离子束诱发色素突变适宜的技术参数,进行了色素突变体的筛选和突变体遗传稳定性分析,利用RAPD技术初步分析了色素突变体的变异,获得如下主要结果: 1.低能离子注入黄曲霉孢子后,呈现出一种先降后升再降的“马鞍型”剂量存活曲线;在相同的能量和剂量下,质量数越大的离子,菌株的存活率也越低;N+注入的平均突变率明显高于Ar+。出发菌株最适的注入离子为N+,最适的注入能量为10keV、注入剂量为1.56×1015ions/cm2~2.08×1015ions/cm2。 2.经过两轮筛选,选育出不产红色素的突变菌株AF-NR。与出发菌株相比,在λ=395nm处的吸光度有了明显的降低。对该菌株进行了进一步的纯化和传代实验,结果表明该菌株在遗传性状上表现稳定。同时,甾体转化率的薄层层析估测表明,低能离子注入没有明显影响到该菌株的羟化能力。 3.选用102条随机引物对出发菌株和突变菌株的基因组DNA进行了RAPD比较分析。结果显示:76条引物在两池具有扩增产物,其中8条引物在两池间表现有多态性,有多态性扩增的引物频率为7.85%,表明离子注入诱发了出发菌株基因组DNA分子的变异。将随机引物S96、S382、S388扩增出的差异性片段克隆后测序,发现随机引物S96扩增所得差异性片段与AspergillusfumigatusAf293hypotheticalprotein(Afu6g02340)的部分mRNA有很高的同源性,而S382扩增所得差异性片段与烟曲霉3-异丙基苹果酸脱氢酶的部分mRNA和AspergillusnidulansFGSCA4hypotheticalprotein(AN5886.2),mRNA有很高的同源性,其意义还有待于进一步的研究。 4.初步研究了发酵条件对发酵过程中红色素生成的影响:发现发酵时间的长短对于色素的生成影响较大,而培养温度、接种量、底物浓度则对色素的生成影响不大。
其他文献
棉铃虫(Helicoverpa armigera)属于鳞翅目(Lepidoptera),夜蛾科(Noctuidae),实夜蛾亚科(Heliothinae),棉铃虫属(Helicoverpa Hardwick)。棉铃虫是一种多食性害虫,具有很强的
脑电(Electroencephalogram,EEG)作为与人类大脑最具直接联系的一种外在表现形式,是临床诊断的重要手段之一。而事件相关电位(Event Related Potentials,ERP)由于与人类的心
在本篇文章中,首先我们研讨了色散的起因、色散对系统的影响、当前常用的克服色散的方法,我们的相关的试验研究、测试及结果分析,最后提出了一种新的色散自动补偿方案,即基于
集群移动通信系统是一种指挥调度系统,通常采用单工或半双工方式通信.这种通信方式具有效率高、设备简单、耗电少、成本低和组网容易等优点.随着通信技术的不断发展,集群通信
本文的目标是设计一个实时的非相干水声通信系统,并在SHARC 21160 DSP处理系统中实现,最后通过试验对其进行了检验.首先,本文运用Hadamard编解码、非相干调制解调、帧同步、
本文首次从科学学的角度,把生态科学作为一个系统整体,考察其在“自然—科技—经济—社会”大系统中的产生和发展的过程,并对它的演进机制、学科范式特征及对可持续发展的贡献进
启动子是生物体自身基因表达调控的重要元件,也是基因工程表达载体的一个重要元件。从生物体中分离、研究启动子,不仅可以让人们更深入地了解生物生长发育的分子机理,同时也为基
早期的移动通信技术主要关注语音通信,之后更多的注意力转移到了系统提供各种媒体消息的优化处理,这些媒体消息有视频点播,电视,广播网络接入,视频流等等。这个过程开始于WCDMA系
本论文主要对CDMA多用户检测算法进行研究.首先从CDMA通信系统出发,研究了CDMA通信中传统检测方法和多用户检测技术,并对现有的多用户检测方法进行了归纳和分析.重点介绍了自
目前,集群通信系统的全数字化已是大势所趋,数字集群系统在传输可靠性、抗干扰性、保密性、灵活性、系统容量等方面都远远优于模拟集群系统.然而,数字通信系统由于系统内外的