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脑出血是脑卒中的主要类型之一，致死、致残率高，后遗症多。近10年来，脑出血的防治被我国政府列为重点研究、联合攻关项目。本研究用胶原酶诱发脑出血模型，探讨脑出血后前脑神经元损伤机制和自我修复与保护机制及三七总皂甙的作用。 1 脑出血大鼠前脑凋亡调控基因Caspase-3、Bcl-2的表达及三七总皂甙的作用 应用原位杂交和免疫组化技术研究发现脑出血后1-7d大鼠前脑病灶周围、皮层Ⅱ-Ⅴ层和海马CA2、CA3区促凋亡基因Caspase-3的阳性表达及蛋白活化增加，阳性细胞包括神经元和胶质细胞，神经元的表达以早期最为明显。给药后阳性细胞数量与反应明显下降，说明三七总皂甙可通过抑制Caspase-3mRNA的转录与Caspase-3的活化，减少神经元凋亡。脑出血后Bcl-2mRNA及蛋白在病灶周围、顶叶、额叶、梨状区皮质、海马CA1-CA4区表达增高，神经元的阳性表达尤为突出。给药后阳性细胞数量与反应强度明显上调，说明三七总皂甙可通过增强Bcl-2mRNA的转录与蛋白表达，抑制细胞凋亡，促进神经元的存活。 2 脑出血大鼠前脑NGF、BDNF、TrkB及p75NTR的表达及三七总皂甙的作用 脑出血后病灶内部NGF、BDNF、TrkB的表达明显下降，NGF、BDNF在病灶周围、大脑皮质和海马等部位的表达上调。TrkB在大脑皮质和海马等部位的表达有所上调，但阳性细胞数量很少。三七总皂甙增强了NGF、BDNF、TrkB在病灶周围、大脑皮质和海马的表达，尤其是海马CA2、CA3区的表达明显提高。NGF、BDNF、TrkB在神经元的表达以1-3d为多，7d后有所下降，而胶质细胞仍维持较高表达。脑出血后神经营养因子低亲和力受体p75NTR在病灶周围、皮层表达上调，海马很少表达。三七总皂甙可降低p75NTR的阳性表达。三七总皂甙可能通过刺激神经营养因子及高亲和力受体，降低低亲和力受体，发挥保护作用。 3 脑出血大鼠前脑兴奋性氨基酸NMDA受体和AMPA受体的表达及三七总皂甙的作用 脑出血后大鼠前脑NMDA受体的三个亚基NR1、NR2A、NR2B在病灶内部少量表达，病灶周围、大脑皮质、海马等部位均有不同程度的高表达，阳性细胞多为神经元。NR1在前脑的阳性表达高于NR2A、NR2B。NMDA受体的过度激活是脑出血后神经元损伤的主要机制之一，三七总皂甙明显降低NR1、NR2A、NR2B在病灶周围、皮层、海马神经元的阳性表达，从而发挥对受损神经元的保护作用。脑出血后病灶内部AMPA受体GluR2亚基表达呈阴性，海马很少表达，但病灶周围和同侧皮质神经元的表达增强。继发性损伤或受损较轻的神经元可能通过上调GluR2亚基的比例，降低AMPA受体Ca2+通透性，起到一定的自身保护作用。但重度或致死性损伤导致GluR2的急剧下降，Ca2+通透性增高，加速神经元的死亡。三七总皂甙在抑制NMDA受体表达的同时，对GluR2阳性表达有增强作用，从两方面抑制兴奋性毒性损伤。 4 脑出血大鼠侧脑室室管膜下区细胞的变化及三七总皂甙的作用 脑出血后侧脑室室管膜下区（the subventricular zone，SVZ）PCNA、GFAP、bFGF阳性表达增强。PCNA、GFAP阳性细胞除沿胼胝体下呈条带或流状表达外，还可分别形成从外侧壁SVZ上部和下部趋向病灶周围的迁移流。7d后可见bFGF阳性细胞自侧脑室上壁和外侧壁SVZ流状迁移至病灶周围。脑出血后侧脑室SVZ的Tuj-1阳性细胞增多，由于Tuj-1阳性细胞数量少，未见形成迁移流趋向病灶周围，但在病灶周围有散在Tuj-1阳性细胞出现。三七总皂甙不仅能促进脑出血后侧脑室SVZ神经干细胞增殖的加速，同时促进新生细胞向星二 三七总皂贰对脑出血大鼠前脑神经元保护作用的机制研究形龈细胞和神经元的分化。并可促进其向病渊围的迁移，但未能使新生神经元通过胶质掇痕进入坏死区。 此外，棚究还进一步探讨了大鼠尾壳核出血赂层神经元阶性变哇的影响。发现尾壳核出血脓质神经元损肺关的 P’一、NMDA州、NRZA、NRZB)受体、Caspase刁pm和与神经保护作用相关的Bel刁、GI uRZ、NGF、BDNF、TrkB s均增高。提示尾壳核出血同时触发坏死和／或凋亡溅和主动神经元存活龈，两者的强弱可能决定受损神经元的生死。 总之，脑出血在导致大鼠前脑神经元损伤的同时激活自身修复与保护机制。神经元自身修复与保护主要发生在损伤早期，即脑出血后7d内，之后以非神经细胞的保护作用为主。脑出MIJ激瓣凋亡蛋白Cas的se刁p20、凋亡相关受蜘””、兴奋牲赃酬A受体的表达，在细胞损伤过程中起重要作用；同时激发抑凋亡蛋白k12，包括NGF、BDNF、TrkB在内的神经营养因子及受体、AMPA受螂lllRZ 亚基发挥保护作用。脑出血损伤激活大鼠侧脑室SVZ神经干细胞的增殖与姚。新生懈细胞与神经元除沿铡迁移流迁移，也可能迁移至病腿围，试图剩吭该部位因损伤所致神经元缺失，这雕腑自身修复的重要机制之一。三七总皂抚通迎中制Caspase－3hRNA的转录与蛋白的瓣活化，促娜c12IuRNA的转录与蛋白表达，脓／’一的表达，促进对细胞凋亡的抑制Z通过脓删OA受体的表达，增高栅A受例IUm亚基的表达降低兴奋性毒性作用；通硼强NGF、BDNF、TrkB等神经营养因子及受体的表达促进其保护作用；并能促铡脑?