RNA干扰沉默HIF-1α基因对人肾癌细胞株786-O裸鼠移植瘤生长的影响

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目的:采用RNA干扰靶向沉默HIF-1α基因的表达,研究其对人肾癌细胞株786-O裸鼠移植瘤生长的影响。方法:将人肾癌786-O细胞体外培养,选取对数生长期细胞接种于裸鼠右侧前肢腋窝皮下致瘤,15天后随机分成三组:实验组(重组质粒组)、阴性对照组(空载体组)、空白对照组。利用本课题组前期已成功构建并通过验证有效的HIF-1α基因的siRNA表达载体多点注射于移植瘤瘤内及瘤周;空载体对照组予以等量空载体多点注射瘤内及瘤周;空白对照组不做任何处理,每3天注射一次,共注射8次,统计移植瘤生长体积。50天时,颈椎脱臼法处死裸鼠,剥离瘤体组织,称重,并采用免疫组化检测HIF-1α、VEGF蛋白的表达。结果:常规病理切片证实各组均成功建立裸鼠人肾癌的皮下移植瘤模型。实验结果显示:实验组裸鼠移植瘤的生长较阴性对照组和空白对照组明显受到抑制(P<0.01),阴性对照组和空白对照组比较无统计学差异(P>0.05)。免疫组化结果显示:实验组HIF-1α、VEGF蛋白表达明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),阴性对照组和空白对照组比较无显著差异。结论:采用RNA干扰沉默HIF-1α基因表达后,能有效抑制裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是HIF-1α有效下调了VEGF的表达,这有望成为肾癌基因靶向治疗的有效靶点。
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