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目的:1、探索肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS)基因 DNA甲基化水平与原发性高血压(essential hypertension,EH)间的关联;2、初步探讨 RAAS基因 DNA甲基化水平是否受抗高血压药物治疗及其他环境因素的影响,为 EH的预防、治疗和抗高血压药物的研发提供理论依据。 方法:1、按年龄和性别1:1:1匹配原则,共选取288例宁波市汉族居民进行病例对照研究,其中正常对照组96例,未接受过抗高血压药物治疗的新发病例组96例,接受过抗高血压药物治疗的既往病例组96例。通过调查问卷、常规体检及实验室检测,获取研究对象的基线资料、血液样本及血生化指标; 2、以焦磷酸测序法检测 RAAS基因启动子区 CpG位点的甲基化水平。经数据库筛选、软件预测及预实验结果,最终确定并检测了 RAAS中的ACE2、AGTR1、CYP11B2这三个基因的甲基化水平; 3、采用 Logistic回归和多元线性回归分析进行混杂因素的校正,探讨对EH、抗高血压药物治疗及其他环境因素敏感的CpG位点。采用广义多因子降维(generalized multifactor dimensionality reduction,GMDR)法与 Logistic回归分析探讨与EH相关的潜在交互作用。 结果:1、经 Logistic回归多因素分析:(1) A C E2基因:与对照组相比,新发病例组的CpG4和 CpG5甲基化水平增高(对照组 v s.新发病例组(%):CpG4:95.73±9.11 vs.97.56±5.65,odd ratio(OR)=1.119,adjusted P=0.014;CpG5:11.47±3.67 vs.12.75±4.15,OR=1.145,adjusted P=0.041),而既往病例组的C p G1甲基化水平增高(对照组 vs.既往病例组(%):69.97±2.40 vs.72.13±4.92,OR=1.465,adjusted P=0.004),且在新发病例组与既往病例组间,既往病例组的CpG1甲基化水平高于新发病例组(新发病例组 vs.既往病例组(%):69.07±5.09 vs.72.13±4.92,OR=1.121,adjusted P=0.034); (2) AGTR1基因:与对照组相比,新发病例组的CpG1甲基化水平降低(对照组 v s.新发病例组(%):9.66±5.45 vs.6.74±4.32,OR=0.888,adjusted P=0.040),既往病例组的CpG1甲基化水平也降低(对照组 vs.既往病例组(%):9.66±5.45 vs.4.99±3.97,OR=0.454,adjusted P=0.027),而在新发病例组与既往病例组间,未见有差异的C p G位点;(3) CYP11B2基因:未见有差异的CpG位点。 2、在正常对照组中,(1) ACE2基因:与男性相比,女性的CpG2甲基化水平降低,CpG5甲基化水平升高(男性 vs.女性(%):CpG2:36.37±2.22 vs.34.43±2.46,adjusted P=0.009;CpG5:9.00±3.41 vs.13.09±2.88,adjusted P=0.015);与不吸烟组相比,吸烟组的CpG2甲基化水平升高,CpG5甲基化水平降低(不吸烟组 vs.吸烟组(%):CpG2:34.96±2.60 vs.36.29±1.93,adjusted P=0.048;CpG5:12.24±3.05 vs.7.88±4.23,adjusted P=0.008);(2) C Y P11 B2基因:与男性相比,女性的CpG2和 CpG3甲基化水平升高(男性 vs.女性(%):CpG2:41.42±5.07 vs.45.21±2.52,adjusted P=0.016; CpG3:72.24±1.99 vs.72.63±3.09,adjusted P=0.048);(3) A G T R1基因:尿酸与 AGTR1基因 CpG1甲基化水平呈负相关(r=-0.206,adjusted P=0.023)。 3、经 G M D R法和 Logistic回归分析发现,AGTR1基因的CpG1、CpG2、CpG4与 ACE2基因的CpG2、CpG3间构成5阶交互作用(testing balanced accuracy:0.688,cross-validation consistency:8/10,adjusted P=0.011);AGTR1基因的CpG1与高密度脂蛋白构成2阶交互作用(testing balanced accuracy:0.748,cross-validation consistency:10/10,P=0.001)。 结论:1、ACE2基因 CpG4和CpG5的高甲基化,AGTR1基因 CpG1的低甲基化是 EH的危险因素;抗高血压药物治疗会改变 ACE2基因 DNA甲基化水平; 2、ACE2基因 CpG2、CpG5和CYP11B2基因 CpG2、CpG3的甲基化水平在性别间存在差异;吸烟会影响 ACE2基因 CpG2、CpG5甲基化水平;高尿酸会降低AGTR1基因CpG1甲基化水平; 3、AGTR1基因 CpG1、CpG2、CpG4与ACE2基因 CpG2、CpG3间的高阶交互作用,AGTR1基因 CpG1与高密度脂蛋白间的交互作用,可能会增加EH的患病风险。