论文部分内容阅读
目的：1、探索肾素-血管紧张素-醛固酮系统（renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS）基因 DNA甲基化水平与原发性高血压（essential hypertension，EH）间的关联；2、初步探讨 RAAS基因 DNA甲基化水平是否受抗高血压药物治疗及其他环境因素的影响，为 EH的预防、治疗和抗高血压药物的研发提供理论依据。 方法：1、按年龄和性别1:1:1匹配原则，共选取288例宁波市汉族居民进行病例对照研究，其中正常对照组96例，未接受过抗高血压药物治疗的新发病例组96例，接受过抗高血压药物治疗的既往病例组96例。通过调查问卷、常规体检及实验室检测，获取研究对象的基线资料、血液样本及血生化指标； 2、以焦磷酸测序法检测 RAAS基因启动子区 CpG位点的甲基化水平。经数据库筛选、软件预测及预实验结果，最终确定并检测了 RAAS中的ACE2、AGTR1、CYP11B2这三个基因的甲基化水平； 3、采用 Logistic回归和多元线性回归分析进行混杂因素的校正，探讨对EH、抗高血压药物治疗及其他环境因素敏感的CpG位点。采用广义多因子降维（generalized multifactor dimensionality reduction，GMDR）法与 Logistic回归分析探讨与EH相关的潜在交互作用。 结果：1、经 Logistic回归多因素分析：（1） A C E2基因：与对照组相比，新发病例组的CpG4和 CpG5甲基化水平增高（对照组 v s.新发病例组（％）：CpG4：95.73±9.11 vs.97.56±5.65，odd ratio(OR)=1.119，adjusted P=0.014；CpG5：11.47±3.67 vs.12.75±4.15，OR=1.145，adjusted P=0.041），而既往病例组的C p G1甲基化水平增高（对照组 vs.既往病例组（%）：69.97±2.40 vs.72.13±4.92，OR=1.465，adjusted P=0.004），且在新发病例组与既往病例组间，既往病例组的CpG1甲基化水平高于新发病例组（新发病例组 vs.既往病例组（%）：69.07±5.09 vs.72.13±4.92，OR=1.121，adjusted P=0.034）； （2） AGTR1基因：与对照组相比，新发病例组的CpG1甲基化水平降低（对照组 v s.新发病例组（%）：9.66±5.45 vs.6.74±4.32，OR=0.888，adjusted P=0.040），既往病例组的CpG1甲基化水平也降低（对照组 vs.既往病例组（%）：9.66±5.45 vs.4.99±3.97，OR=0.454，adjusted P=0.027），而在新发病例组与既往病例组间，未见有差异的C p G位点；（3） CYP11B2基因：未见有差异的CpG位点。 2、在正常对照组中，（1） ACE2基因：与男性相比，女性的CpG2甲基化水平降低，CpG5甲基化水平升高（男性 vs.女性（%）：CpG2：36.37±2.22 vs.34.43±2.46，adjusted P=0.009；CpG5：9.00±3.41 vs.13.09±2.88，adjusted P=0.015）；与不吸烟组相比，吸烟组的CpG2甲基化水平升高，CpG5甲基化水平降低（不吸烟组 vs.吸烟组（%）：CpG2：34.96±2.60 vs.36.29±1.93，adjusted P=0.048；CpG5：12.24±3.05 vs.7.88±4.23，adjusted P=0.008）；（2） C Y P11 B2基因：与男性相比，女性的CpG2和 CpG3甲基化水平升高（男性 vs.女性（%）：CpG2：41.42±5.07 vs.45.21±2.52，adjusted P=0.016； CpG3：72.24±1.99 vs.72.63±3.09，adjusted P=0.048）；（3） A G T R1基因：尿酸与 AGTR1基因 CpG1甲基化水平呈负相关（r=-0.206，adjusted P=0.023）。 3、经 G M D R法和 Logistic回归分析发现，AGTR1基因的CpG1、CpG2、CpG4与 ACE2基因的CpG2、CpG3间构成5阶交互作用（testing balanced accuracy：0.688，cross-validation consistency：8/10，adjusted P=0.011）；AGTR1基因的CpG1与高密度脂蛋白构成2阶交互作用（testing balanced accuracy：0.748，cross-validation consistency：10/10，P=0.001）。 结论：1、ACE2基因 CpG4和CpG5的高甲基化，AGTR1基因 CpG1的低甲基化是 EH的危险因素；抗高血压药物治疗会改变 ACE2基因 DNA甲基化水平； 2、ACE2基因 CpG2、CpG5和CYP11B2基因 CpG2、CpG3的甲基化水平在性别间存在差异；吸烟会影响 ACE2基因 CpG2、CpG5甲基化水平；高尿酸会降低AGTR1基因CpG1甲基化水平； 3、AGTR1基因 CpG1、CpG2、CpG4与ACE2基因 CpG2、CpG3间的高阶交互作用，AGTR1基因 CpG1与高密度脂蛋白间的交互作用，可能会增加EH的患病风险。