第一部分 AS1411-PLGA@FePc@PFP的制备、表征及生物安全性评价目的:制备一种搭载酞菁铁(FePc)的相变型靶向乳腺癌的纳米粒,验证其理化性质、稳定性和生物安全性。方法:使用双步乳化法和碳二亚胺法合成相变型靶向纳米粒A-FP NPs(AS1411-PLGA@FePc@PFP),PLGA 搭载 FePc 于壳上,全氟戊烷(PFP)装载于内核,适配体AS1411连接于PLGA外面作为靶向探针。同时也制备出了相变型非靶向纳米粒FPNPs(PLGA@FePc@PFP)和靶向空白纳米粒A-P NPs(AS1411-PLGA@PFP)。用激光共聚焦显微镜观察AS1411与FP NPs(PLGA@FePc@PFP)连接情况,用流式细胞仪检测连接率。用TEM观察A-FP NPs形态,马尔文粒径仪测定对比 A-FP NPs 与 FP NPs 粒径、电位。测定 A-FP NPs、A-P NPs、FePc的吸收光谱,计算FePc的标准曲线和包封率。监测A-FP NPs在2周内的稳定性,用相机拍照记录其宏观变化。利用CCK-8检测不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/ml)的 A-FPNPs 与细胞孵育 24h 后对细胞的毒性。将昆明鼠随机分为5组(Control组和1、3、7、14天组)进行血常规、血生化分析和重要脏器HE染色。结果:成功制备性质稳定的AS1411-PLGA@FePc@PFP(A-FP NPs),透射电镜下可见大小均一、分散良好的球形,AS1411与PLGA@FePc@PFP连接率达(96.20±2.32)%。A-FP NPs 和 FP NPs 的直径分别为201.87±1.60 nm和185.13±5.04 nm,表面电位分别为-10.67±0.25 mV 和-14.30±1.15 mV,包封率为(82.26±2.39)%。可见 A-FP NPs的吸收光谱与FePc的吸收光谱相似,A-PNPs因为未搭载FePc而在660nm处未见明显吸收峰。经过长达14天的观测,A-FP NPs的粒径稳定。A-FP NPs的生物安全性在体内外均良好,未见明显安全性引起的死亡。结论:成功制备了载酞菁铁的相变型靶向纳米粒A-FP NPs,它结构较稳定,具有良好的包封率,在近红外波段有明显吸收峰,生物安全性高,可用于进一步实验。第二部分AS1411-PLGA@FePc@PFP的体内外双模态成像研究目的:探讨A-FP NPs的光致相变(ODV)能力和在体内外光声/超声双模态成像能力。方法:利用激光辐照A-FP NPs,于光镜下观察其光致相变情况。全波长扫描找到最佳激发波长。将不同浓度的A-FP NPs加入凝胶模型行体外光声成像,通过光声成像仪观察其光声成像能力,并分析光声信号强度值。经660nm激光辐照后观察其增强超声成像的能力,勾画感兴趣区,探测信号强度值。建立雌性荷瘤鼠模型后随机分为2组,经尾静脉分别注射A-FP NPs和FP NPs,进行体内光声成像,在不同时间点(pre、3、6、12、24h)观察肿瘤部位的光声图像和记录对应信号值;经尾静脉分别注射A-FPNPs和FPNPs后6h时,使用660nm激光辐照肿瘤部位,观察超声造影信号并测量对应强度值。结果:在光镜下可观察到经激光辐照后,A-FP NPs从纳米粒液-气相变为微泡,而A-P NPs则未见相变。在体外光声/超声成像中,A-FP NPs光声/超声信号强度随浓度增加而增强。体内光声/超声成像实验可见6h时靶向组信号强度达最高,相较于非靶向组更早的到达肿瘤部位、信号强度更高,可持续较长时间。结论:A-FP NPs在体内外表现出良好的光声/超声成像效果,实现了较好的体内靶向效果,证明了 A-FP NPs利于影像监测和引导治疗成像的良好性能。第三部分AS1411-PLGA@FePc@PFP对乳腺癌细胞的光热治疗目的:探讨A-FP NPs的光热转化能力,光热稳定性,对人乳腺癌MCF-7细胞的体外靶向能力和光热治疗效果。方法:使用不同浓度的A-FP NPs探索了其光热转化能力,找到体外光热治疗的最佳浓度,检测了其光热稳定性。利用CLSM观察A-FP NPs对MCF-7细胞的靶向。使用近红外660nm激光辐照了与A-FP NPs共培养的MCF-7细胞培养皿,进行光热治疗,经过CAM/PI共染色后用CLSM观察细胞的活死状态,用FCM检测细胞凋亡率。结果:A-FP NPs有较好的体外靶向能力,共孵育1h后可实现部分靶向,4h时已经大量富集在肿瘤细胞核周围。同时,它具有良好的光热转化能力,可利用光热转化实现较快升温,利用热效应有效杀伤乳腺癌细胞,凋亡率可达87.86±4.27%。它光热稳定性好,可用于反复辐照治疗。结论:A-FPNPs在体外实验中对MCF-7细胞杀伤效果明显,光热转化能力强、稳定性好。具有潜在的诊疗一体化的研究价值,为肿瘤的治疗方式提供了更多的可能。