越橘(Vaccinium spp．)为多年生落叶或常绿灌木或小灌木。果实中含有大量对人体健康有益的物质，越橘果实中的花青甙色素，可促进和活化视网膜的视红素再合成，从而提高眼睛对暗环境的适应能力。同时，越橘果实还具有防止脑神经衰老、增强心脏功能、抗氧化、抗溃疡、抗炎及抗癌等独特功效。但越橘为浅根系植物，干旱胁迫对其影响很大，而利用常规育种方法选育耐旱越橘新品种既费时又费力。由于越橘无性繁殖和遗传背景复杂的特点，特别适合于进行定向基因转导选育新品种。本文以高丛越橘‘埃利奥特’，半高丛越橘‘北陆’，矮丛越橘‘芬蒂’3个越橘品种为材料，用叶片作为外植体进行离体再生培养，对越橘叶片再生基因型进行了筛选，对‘北陆’离体叶片再生体系进行了优化，建立了农杆菌介导的遗传转化体系，经过PCR初步检测，获得携带BADH基因的抗性植株。研究结果如下：1．本试验对‘埃利奥特’，‘北陆’，‘芬蒂’3个越橘品种进行叶片不定芽再生的基因型筛选，发现‘北陆’不但再生频率最高，并且增殖能力强，来源稳定，遗传稳定性良好。为此，试验选定‘北陆’做进一步再生和转化的研究。2．研究了激素浓度和配比对越橘叶片再生的影响，‘北陆’离体叶片在改良WPM+1.0mg／L ZT培养基中可直接再生出不定芽，再生频率可达96.3％，不定芽生长试强。CPPU处理的叶片再生频率为95.3％，生长势较弱。BA处理的叶片最低，仅达51％。TDZ和NAA处理随着NAA浓度的增加，再生频率明显降低。另外，接种方式和pH值也影响越橘叶片再生不定芽，将‘北陆’叶片正放到pH为5.4的改良WPM+ZT 1.0mg／L培养基上，对越橘叶片的再生具有促进作用。3．越橘对抗生素非常敏感，选择培养中抗生素浓度不宜过高，容易影响不定芽的分化。选用50mg／L Kan即可有效地抑制非转化芽的再生。农杆菌脱菌处理可先用含有500mg／LCef液体再生培养基和无Cef液体再生培养基各冲洗3次，用滤纸吸干液体，接种到含有300mg／L Cef的筛选培养基中，可抑制农杆菌的生长。4．在建立‘北陆’叶片不定芽再生体系的基础上，对影响根癌农杆菌遗传转化的各因素进行了研究。结果表明：侵染前将‘北陆’叶片预培养3天有助于转化，共培养2天以及在共培养培养基中加入100mg／L AS有利于提高转化率。共培养后延迟5天进行筛选可以明显提高转化率。用解剖刀在叶片远轴面中脉处横切两刀(尽量不切断的叶片)的切割方式可以减少对叶片的伤害，进而提高转化率。5．经过Kan筛选，获得了7株Kan抗性植株，甜菜碱醛脱氢酶基因的两端序列为特异引物进行PCR检测，在7个被检测的Kan抗性株系中有1株显阳性反应。初步证明BADH基因已经成功地整合到越橘基因组中。