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藏紫菀为菊科(Compositae)紫菀属植物缘毛紫菀(Aster souliei Franch.)的干燥花序。缘毛紫菀为多年生草本植物,生长在海拔2700~4000 m的高山针叶林体外缘、灌丛以及山坡草地或河滩草坝,分布于甘肃、青海、四川、云南、西藏等地。民间常以花或根茎入药,具有清热解毒,镇咳祛痰功效,用于瘟疫病,中毒症,支气管炎,咳嗽气喘,咳吐脓血。现代药理研究表明紫菀属植物具有抗肿瘤,抗真菌等药理活性。目前国内外对该属植物化学成分研究较多,但对缘毛紫菀的系统研究未见报道。
目的:通过对藏紫菀的化学成分进行系统研究,阐明其药理活性的物质基础。在此基础上,采用高效液相色谱-质谱联用方法对藏紫菀质谱特征进行分析。
方法:藏紫菀经95%乙醇提取,浓缩成浸膏,经溶剂分步萃取,应用硅胶柱层析、聚酰胺柱层析、Sephadex LH-20柱层析、制备薄层等技术,从藏紫菀中分离纯化化学成分,根据其理化性质并运用IR、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等波谱方法,参考文献报道的数据,鉴定化合物的结构。采用高效液相色谱-质谱联用方法,梯度洗脱,对藏紫菀甲醇提取物进行分离分析,通过与对照品及参考文献比较的方法对各组分进行分析。同时在对藏紫菀指纹图谱方法学的初步研究中,采用Agilent TC-C18(2)柱,甲醇-水(0.1%HAc)为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,考察方法的精密度、稳定性、重现性,并通过与紫菀(Aster tataricus L.f.)对比分析研究验证方法的适用性。
结果:从藏紫菀的中分离得到了18个化合物,通过理化常数测定和光谱数据分析等技术鉴定了其中16个化合物的结构,分别为α-菠菜甾醇(Ⅰ),齐墩果酸(Ⅱ),(Ⅲ),β-谷甾醇(Ⅳ),18,19-二羟基-5α,10β-新克罗烷-二烯-丁烯羟酸内酯(Ⅴ),胡萝卜苷(Ⅵ),水杨酸(Ⅶ),香草酸(Ⅷ),异鼠李素(Ⅸ),芹菜素(Ⅹ),山奈酚(Ⅺ),槲皮素(Ⅻ),大波斯菊苷(ⅩⅢ),槲皮素3-0-(6"-咖啡酰基)-β-D-吡哺葡萄糖苷(ⅪⅤ),芦丁(ⅩⅤ),芹菜素-7-0-β-D-吡喃葡萄糖醛酸正丁酯(ⅩⅥ),芹菜素-7-0-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(ⅩⅦ),(ⅩⅧ)。优化确定了藏紫菀HPLC-ESI的检测分析条件,发现了15个特征峰及其质谱特征,通过与对照品对照,确定了9个化合物的结构。方法学的精密度、稳定性、重现性均符合要求。
结论:从藏紫菀分离鉴定了18个化合物,其中化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅶ,Ⅷ,Ⅸ,Ⅺ,Ⅻ,ⅩⅢ,ⅩⅣ,ⅩⅥ,ⅩⅦ为首次从缘毛紫菀中分得,化合物Ⅲ和ⅩⅧ的结构正在鉴定中。
另外,首次通过液相色谱-质谱联用方法对藏紫菀质谱特征的分析,为藏紫菀化学成分的定性分析提供了一种快速、准确的分析手段。