含铜亚硝酸还原酶(CuNiR)拥有稳定的三聚结构,催化亚硝酸向气态一氧化氮的还原反应,直接导致氮素从陆表环境的流失,在脱氮途径中扮演着重要角色.一段延伸的C-末端肽段是CuNiR的保守结构特征,它以β-sheet形式介导单体间相互作用,在酶四级结构与活力维持方面发挥着重要功能.对源自Achromobacter cycloclastes的CuNiR截短突变体研究表明:C-末端去五肽亚硝酸还原酶(NiRc-5)仍保持着稳定的三聚结构,但酶活下降了约30％,是第一个开始部分失活的羧端截短体;而C-末端去十一肽亚硝酸还原酶(NiRc-11)不再形成稳定三体而且酶活力完全丧失.开展这两类截短突变体的晶体结构研究将进一步阐明C-末端肽段在CuNiR高级结构与酶活力维持中的角色.该论文采用悬滴气相扩散法得到NiRc-5正交晶体以及NiRc-11单斜与四方晶体;对NiRc-5开展了不同pH值及底物结合条件下的系列晶体结构研究,在1.9-2.3A范围测定了五个相关结构;同时还在2.6A水平测定了NiRc-11单斜晶体结构.结构解析揭示NiRc-5中铜活性位点微环境发生变化,导致酶活部分丧失;而NiRc-11铜活性位点发生严重畸变,导致酶活完全丧失.该研究发现:羧端肽段虽未直接参与铜活性中心构建,但通过介导三聚体形成,促使酶完全必要的折叠构象调整,对金属铜位点产生平衡制约作用,辅助形成酶活发挥必需的活性位点局部环境.基于结构,该论文还探讨了C-末端肽段截短后蛋白发生SDS-抗性、吸收光谱等自身性质改变的原因.人酚磺酰基转移酶(PST)催化体内芳香酚类内源或外源底物的硫酸化反应,在人体排毒代谢以及神经递质、激素等重要内源化合物体内平衡调节中发挥着重要作用.P-PST与M-PST是PST中两个重要亚类,它们拥有93％序列同源性,却在优先底物识别上表现了明显差别,同时M-PST还具有锰依赖的活力骤增及专一性改变特性,开展这两类PST的结构功能比较研究有着很重要的学术与应用价值.该论文采用气相扩散法共得到一种P-PST晶体、三种M-PST晶体,并在2.3A水平解析了P-PST晶体结构,在2.6-3.5A水平进行了M-PST及其"酶-多巴胺"底物复合物的分子置换法研究.这些结果为进一步的结构解析及两类PST的结构-功能比较分析奠定了坚实基础.