艾滋病是由HIV病毒引起的,攻击人体免疫细胞的疾病,又称人类免疫缺陷综合征。艾滋病自1981年发现到现在已有三十多年的时间,已经夺去了2500多万人的生命。现在仍然没有特效治疗药物以及安全有效的抗HIV疫苗,目前治疗方法多是通过几种靶点药物联合使用抑制病毒增长,延长患者寿命。但仍然存在着上市药物价格昂贵、长期服用毒性高以及出现许多药物耐药株等弊端,需要寻找新型来源的药物来治疗或辅助治疗艾滋病。我国中医药理论博大精深,中草药在我国医学历史中具有重要的地位。虽然随着医药的国际化,统一化,中药有些理论、标准无法用现代医学的观点来解释、阐明。但我们不能盲目否定中药的地位,要用科学的态度,发展的眼光对待中药的问题。砒霜治疗白血病及青蒿素治疗疟疾的成功是传统中医与现代医学理论相结合的典型案例。近年来,从天然植物中不断发现具有抗HIV-1作用的生物活性大分子。因此,从天然植物中寻找抗HIV活性物质成为适合中国国情的研究方向。鼠李属(Rhamnus)植物广泛分布于世界各地,并从鼠李属植物提取物中发现含有很多生物活性分子,具有保肝、利尿、通便、解酒等药用价值。并且也发现一些种类的鼠李属树皮、树叶提取物在抗细菌、抗病毒、抗肿瘤、抗过敏、抗氧化方面具有很重要的价值。本课题研究目的在于针对HIV-1的整合酶靶点从鼠李属植物KY-03中筛选出具有抗HIV-1作用的有效成分。实验以60%乙醇和90%乙醇为溶剂,采用渗漉法得到粗提物,并通过BIAcore SPR技术检测粗提物与IN蛋白的结合情况,发现60%乙醇提取物与整合酶结合值比较高。用单轮细胞感染实验,在细胞水平测定粗提物的抗HIV-1效果,实验结果显示60%乙醇粗提物抗HIV效果最好,与SPR结果相一致。随后将抗病毒成分较好的60%乙醇粗提物通过偶联HIV-1整合酶的富集柱,分离纯化粗提物中的有效组分,再通过BIAcore SPR和细胞药效实验验证有效组分的抗HIV-1效果,最终得到L1-5,L1-6,L2-5三管富集产物抗HIV-1效果较好。运用HPLC-MS对三管有效富集产物进行化合物分子量的分析,并与化学数据库以及中药材成分数据库进行比对分析,得到了4种有效化合物,四种化合物属于蒽醌类化合物,分别命名为化合物2,3,4,5。得到四种化合物后利用i GEMDOCK对接软件、Discovery Studio 2.5与HIV-1整合酶靶点进行分子对接分析,发现四种化合物与靶点的结合效果排序为化合物4,3,5,2。