目的:探讨二氢丹参酮Ⅰ(Dihydrotanshinone I,DHI)对骨肉瘤细胞的抑制作用及其机制。方法:采用结晶紫染色法检测浓度不同的DHI对人骨肉瘤细胞(MG-63、143B、Saos2、U2OS)增殖能力的影响;用MTT法进一步验证DHI对人骨肉瘤细胞(MG-63、143B)增殖能力的作用。通过克隆形成实验、Transwell迁移侵袭实验、细胞划痕实验、Hoechst 33258染色以及应用流式细胞术等实验方法检测浓度不同浓度的DHI对人骨肉瘤细胞(MG-63、143B)克隆形成能力、迁移能力、侵袭能力及凋亡能力的影响。随后用浓度不同的DHI(Control、0、2、4、6μM)处理人骨肉瘤143B细胞,通过蛋白印迹法(Western Blot)检测用DHI处理的人骨肉瘤143B细胞和未用DHI处理的人骨肉瘤143B细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Snail、MMP-2、MMP-7、MMP-9、N-Cadherin、Bcl-2、PARP、Cleaved–PARP、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、LRP6、β-Catenin、Cyclin D1、c-Myc等蛋白表达水平的变化。采用荧光素酶报告基因系统检测人骨肉瘤143B细胞中Wnt/β-Catenin信号通路活性变化。为了进一步验证DHI在体外对骨肉瘤的影响,我们建造了裸鼠原位骨肉瘤模型,并通过DHI(灌胃剂量5、15、25mg/kg)灌胃的方式(每2天灌胃一次)处理原位骨肉瘤裸鼠模型,每2天测量骨肉瘤的大小,建模21天后处死裸鼠取瘤体进行免疫组化检测PCNA、N-Cadherin、Bcl-2、β-Catenin的表达。结果:结晶紫试验显示,DHI能够降低人骨肉瘤细胞(MG-63、143B、Saos2、U2OS)增殖能力(P<0.05)。同时MTT法、克隆形成试验、Transwell实验、细胞划痕试验、Hoechst 33258染色以及应用流式细胞仪检测结果表明,在人骨肉瘤细胞(MG-63、143B)中DHI能够降低肿瘤细胞增殖能力、克隆形成能力、迁移能力、侵袭能力(P<0.05),并诱导细胞凋亡(P<0.05)。荧光素酶报告基因系统结果显示,DHI处理组Wnt/β-Catenin信号通路活性明显降低(P<0.05)。蛋白印迹试验结果显示,DHI处理组中上调PARP、Cleaved–PARP、Cleaved Caspase-3及Caspase-3等蛋白的的表达(P<0.05),同时下调PCNA、Snail、MMP-2、MMP-7、MMP-9、N-Cadherin、Bcl-2、LRP6、β-Catenin、Cyclin D1、c-Myc等蛋白的表达(P<0.05)。DHI体外实验显示,DHI灌胃组骨肉瘤瘤体的生长速度减慢。肿瘤组织免疫组化结果显示,DHI灌胃组抑制了PCNA、Bcl-2、N-Cadherin和β-Cadherin等蛋白的表达。结论:DHI可通过抑制Wnt/β-Catenin信号传导途径而抑制人骨肉瘤增殖、迁移、侵袭,诱导细胞凋亡。