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乳腺癌是威胁女性健康的“第一杀手”。乳腺癌患者的死亡最主要的一个原因就是乳腺癌的转移,其中,60-70%的乳腺癌患者的死亡是因为发生了乳腺癌的肺部转移。因此设计和构建能抑制乳腺癌肺转移的药物输送系统已成为乳腺癌治疗研究领域中极为迫切并极具挑战性的关键课题之一。本研究结合光热技术和RNA干扰技术,设计构建白蛋白仿生的纳米制剂共输送光敏剂和siRNA用于抗乳腺癌增殖和转移的研究。 本文通过二硫键将穿膜肽R9结合到二油酰磷脂酰乙醇胺DOPE上制备了细胞内还原响应性的穿膜肽衍生物DOPE-S-S-R9,将近红外染料IR780包载在DOPE-S-S-R9与DOPE形成的纳米制剂(DRI)中,然后通过静电作用压缩Twist蛋白干扰RNA(siTwi)形成DRI-S,并在此基础上通过静电作用进行HSA的仿生化修饰,形成白蛋白仿生纳米制剂(DRI-SH),用于光热治疗剂和干扰RNA的输送。对DRI、DRI-S、DRI-SH三种纳米制剂的处方组成进行了优化,并对其粒径、电位及体外光热效果等理化特性进行表征。结果显示,DOPE-S-S-R9和DOPE按质量比10:1包载IR780制备了纳米制剂DRI,平均均粒径36.53nm,电位+41mV,包封率97.01%。DRI和siTwi按摩尔比9:1制备了纳米制剂DRI-S,平均粒径71.93nm,电位+30.2mV。HSA和 DRI-S按质量比4:1制备了纳米制剂 DRI-SH,平均粒径100.1nm,电位+8.16mV。808nm近红外光照射DRI、DRI-S、DRI-SH纳米制剂,三种纳米制剂在体外均能升温,DRI-SH纳米制剂的温度可达到50℃以上,可产生抗肿瘤活性的效果。 将DRI、DRI-S、DRI-SH三种纳米制剂用于高转移性乳腺癌4T1细胞研究中,对细胞毒性、细胞摄取、抗肿瘤细胞迁移及敲除与转移相关蛋白的能力等进行考察。结果表明:胶束可以有效地被细胞摄取。DRI-S和 DRI-SH可显著地抑制肿瘤细胞的迁移,迁移抑制率可达60%,并且808nm激光器照射后,迁移抑制率可增加至80%,DRI-S与DRI-SH纳米可有效地敲除4T1细胞Twist蛋白。 构建了高转移性乳腺癌4T1皮下瘤模型,考察了DRI、DRI-S、DRI-SH三种纳米制剂在荷瘤鼠体内的分布及光照升温效果,结果表明,三种纳米制剂主要分布在肿瘤、肝脏和肺等部位,其中DRI-SH在肿瘤部位的分布比DRI和DRI-S分别提高了2.7和2.5倍。808nm激光器照射裸鼠的肿瘤部位,三种胶束均能显著升温,DRI-SH的温度可以达到50℃以上。 以上研究结果表明,这种基于结合光热技术和RNA干扰技术,共输送光敏剂和siRNA的白蛋白仿生纳米制剂能够为抑制乳腺癌的生长和转移提供一种有效策略。