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植物多酚是一类广泛存在于蔬菜、水果等植物体内的次生代谢物质,其独特的分子结构使其具有抗氧化、预防心血管病等多种生物活性。龙眼作为代表性的热带亚热带水果,关于其酚类物质及其生物活性研究报道不多。本文选取广东省龙眼主栽品种,比较不同品种龙眼果肉的理化与加工特性、总酚类物质及其组成成分含量,采用4种抗氧化的评价方法比较不同品种龙眼酚类物质提取物的体外抗氧化能力;以小鼠的脾淋巴细胞、人肝癌细胞HepG2和人胃癌细胞SGC-7901为模型,比较不同品种龙眼酚类物质提取物对脾淋巴细胞增殖的促进作用和对肿瘤细胞增殖的抑制作用,并分析其量效关系;同时,探讨龙眼果肉在干燥和果汁加工过程中主要加工工艺对其总酚类物质含量及抗氧化活性的影响。主要实验结果如下:
(1)不同品种龙眼果肉的理化与加工特性评价:分别分析8个龙眼品种的单果重、果壳重比、果核重比、可食率、出汁率、可溶性固形物含量、果汁pH及其糖组分含量和有机酸组分含量,发现不同品种龙眼果肉的理化与加工特性存在显著差异,可溶性固形物含量品种间变幅为14.67-21.53%;出汁率变幅为46.86--61.08%。主要糖类为蔗糖、果糖、葡萄糖,主要酸类为苹果酸、抗坏血酸、草酸。
(2)不同品种龙眼果肉的总酚类物质及其组成成分含量比较:分别测定不同品种龙眼果肉酚类物质总酚含量及其组成成分含量,结果表明,龙眼果肉总多酚含量品种间变幅为60.39-154.07 mg GAE/100g,变异系数为34.23%,平均值为86.54mg GAE/100g,其中“双孖木”品种的总多酚含量最高,“水眼”的含量最低,多数品种间差异达显著水平(p<0.05);总黄酮含量变幅为114.86--1315.98 ug CEQ/100g,变异系数为58.88%,平均值为721.60 ug CEQ/100g。不同品种龙眼中4种主要酚酸类和1种黄酮类单体化合物的含量差异亦较为显著,其中,表儿茶素、丁香酸、香草酸、没食子酸和阿魏酸含量变异系数分别为40.53%、97.21%、43.38%、42.83%、72.64%.
(3)不同品种龙眼果肉的酚类物质提取物的抗氧化作用及其与总酚类物质和其组成成分含量的相关性分析:采用DPPH、FRAP、ABTS和ORAC四种抗氧化测定方法分析不同品种龙眼果肉的酚类物质提取物的体外抗氧化能力,结果表明,不同品种龙眼果肉酚类物质的抗氧化能力差异多数达到显著水平(p<0.05),8个龙眼品种DPPH清除能力SC50值、FRAP值、ABTS值、ORAC值变幅分别为10.13-19.07mg GAE/100g、17.21--41.38 umolOOg、394.30 -836.89 mmol TE/100g、624.78--1855.69 umol TE/100g,变异系数分别为20.10%、34.64%、29.00%、43.62%,平均值分别为15.12mg GAE/100g、23.99umol/1009、562.27 mmol TE/100g、1006.21umol TE/100g;比较不同品种的抗氧化作用与其总酚类物质含量的相关性,发现其抗氧化活性与总酚类物质含量间的相关性达显著水平(p<0.05)。
(4)不同品种龙眼酚类物质提取物对淋巴细胞增殖的促进作用和对肿瘤细胞增殖的抑制作用比较:比较不同品种龙眼酚类物质提取物对淋巴细胞增殖的促进作用和对肿瘤细胞增殖的抑制作用,结果表明,各龙眼品种促进小鼠脾淋巴细胞增殖的EC5o值的变幅范围为46.50-183.63 ug GAE/mL,变异系数为38.36%,平均值为85.59 ug GAE/mL;龙眼果肉品种间抑制人肝癌细胞HepG2增殖的IC50值变幅为14.18-45.15 ug GAE/mL,变异系数41.17%,平均值为27.59 ug GAE/mL:抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖的IC50值变幅为28.38-130.1ugGAE/mL,变异系数为48.80%,平均值为64.94 ug GAE/mL。其中“双孖木”品种在抗氧化、促进脾淋巴细胞增殖、抑制肿瘤细胞增殖都表现出最高的活性。龙眼果肉酚类物质提取物的总酚含量与促进脾淋巴细胞增殖、抑制人肝癌细胞HepG2、人胃癌细胞SGC-7901增殖的活性呈现显著相关性(p<0.05)。
(5)不同干燥方式对龙眼果肉中总酚类物质含量及其抗氧化能力的影响:分别采用0.1%、0.2%、0.5%的柠檬酸前处理,lOs、30s、60s三种不同时间的热烫灭酶前处理,在55℃的热风干燥条件下干燥龙眼果肉,研究不同前处理对龙眼果肉中总酚类物质含量及其抗氧化能力的影响。结果发现30s的热烫前处理龙眼果肉总多酚含量的损失最低,损失率为20.18%;采用自然干燥,冷冻真空干燥,55℃、65℃、75℃三种不同温度热风干燥以及传统全果干燥工艺干燥龙眼果肉,研究不同干燥方式对龙眼果肉总酚类物质含量及其抗氧化能力的影响。结果显示,酚类物质对热敏感,冷冻真空干燥的龙眼果肉总多酚含量的损失率最低,仅为7.28%;抗氧化能力变化与总酚含量变化呈现相同的趋势。
(6)龙眼果汁加工过程中不同操作单元对其总酚类物质含量及抗氧化能力的影响:探讨龙眼果汁加工过程中钝酶、榨汁、离心、壳聚糖澄清、UHT杀菌等关键操作单元对酚类物质含量及抗氧化活性的影响。结果表明,钝酶、榨汁、离心、UHT杀菌等关键操作单元对总酚含量均有不同程度的影响,损失率分别为38.95%,22.88%,13.94%,31.01%,处理前后之间的差异均达到显著水平(p<0.05);同样地,抗氧化能力变化亦与总酚含量变化呈现相同的趋势。