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江西是中国柑橘类水果种植大省之一,青、绿霉病害导致柑橘采后腐烂,引起巨大经济损失。现行化学防腐保鲜剂出现的药物残留、病原抗药性等问题,迫使某些化学杀菌剂被禁用或限制使用,生物源柑橘防腐保鲜剂因其环境相容性好、病原难以产生抗药性等特点,已逐步成为柑橘采后防腐保鲜主流方法。本实验室发现一株野生裸脚菇属菌（Gymnopus sp.）0612-9,其发酵液可有效抑制柑橘青绿霉的生长,但其所产胞外活性物质的结构与性质尚不清楚。本文以意大利青霉和指状青霉为指示菌,依次用大孔树脂动态吸附、正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析（ODS）、半制备高效液相（Pre-Semi HPLC）分离活性物质;通过牛津杯法、改良薄层色谱-生物自显影法（TLC-BA）、薄层色谱-紫外荧光法（TLC-UV）、10%浓硫酸乙醇显色、高效液相色谱仪（HPLC）等方法追踪活性物质;利用抑制菌丝生长法、TLC-BA测定活性物质对青、绿霉抑杀剂量和EC50值;采用ESI-MS、NMR、CD、UV等波谱技术解析化合物结构。结果表明,乙酸乙酯粗提物对意大利青霉和指状青霉的EC50值分别为217.14μg/mL、147.58μg/mL,柑橘果实体内试验结果也表明粗提物对指状青霉的防治效果要好于意大利青霉。粗提物经硅胶柱分离获得两种活性物质,其中活性物质I’对意大利青霉和指状青霉的EC50分别为95.717μg/mL、137.36μg/mL,活性物质Ⅱ’对意大利青霉和指状青霉的EC50分别为213.59μg/mL、319.281μg/mL;通过物质I’和物质Ⅱ’在不同温度、pH值、紫外线照射（UV）、光照和氧化等条件下的稳定性分析得出,物质I’在高温（121℃）、UV、氧化和较广泛pH值（pH 210）条件下都很稳定,光照7 d后抑菌效果有所减弱;物质Ⅱ’在100℃及以下和酸性至中性（pH 27）条件下都较稳定,在光照、氧化下分别处理4 d、9 d后抑菌效果才开始减弱,UV处理4 h后抑菌效果有所减弱。物质Ⅰ’和物质Ⅱ’分别经ODS柱层析、Pre-Semi HPLC分离纯化后得到五种单体化合物,即I-1.1、I-1.2、I2、I3和Ⅱ,经改良TLC-BA检测,五种化合物均对意大利青霉均有抑菌效果,其中化合物I-1.1、I-2、I-3和Ⅱ对意大利青霉有效抑杀剂量为18.6μg,化合物I-1.2对意大利青霉和指状青霉有效抑杀剂量为39.9μg,通过抑菌斑面积大小可以看出化合物I-2和Ⅱ对青霉的抑杀效果更为显著,各化合物在分析型HPLC上保留时间分别为6.05、6.18、7.20、7.05和4.36 min。化合物I-1.2和I-3通过ESI-MS、NMR(1H NMR、13C NMR、2D-NMR、HMBC、HSQC)、CD、UV等波谱数据分析得出,化合物I-3为fulvoferruginin,I-1.2为5-epi-fulvoferru-ginin,两者互为同分异构体,都为胡萝卜烷型倍半萜,两种化合物都是首次从裸脚菇属菌中分得,其中I-1.2为新天然化合物。基于以上研究结果表明,裸脚菇属菌株在对柑橘采后生物防腐保鲜等方面具有巨大开发价值。