论文部分内容阅读
研究目的：
本课题先采用高脂饮食制作代谢综合征模型来观察糖尿病前期征兆，来观察高脂饮食对葡萄糖水平、氧化应激及N-聚糖的影响；再采用高脂饮食联合小剂量腹腔注射STZ来制备2型糖尿病动物模型，进一步观察糖尿病时大鼠的葡萄糖水平、氧化应激、N-聚糖及糖脂蛋白代谢情况。然后通过对正常对照组、模型组、治疗组来分别观察补气活血药对高脂饮食引起的葡萄糖水平、氧化应激及N-聚糖变化的作用及补中益气汤对2型糖尿病大鼠葡萄糖水平、氧化应激、N-聚糖及糖脂蛋白代谢的改善作用。
研究方法：
⑴模型一
将雄性SD大鼠随机分为正常对照组，喂饲普通饲料；模型组，喂饲高脂饲料；补气活血1组（RSA1），2：1补气活血中药灌胃；补气活血2组（RSA2），1：2补气活血中药灌胃。采用分光光度法测定粪便NO代谢产物NO3-、ONOO-,脂质过氧化物MDA,GLU及AMY活性；通过凝集素(PSA、PNA)亲和沉淀法测定AMY凝集素结合率,分析AMY N-聚糖特点，采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法分析AMY酶谱，并作统计学分析。
⑵模型二
①从61只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组；剩下的SD大鼠用于造模，将造模成功的大鼠（72小时后空腹血糖值>16.7mmol/L）随机分为模型组10只、治疗Ⅰ组10只、治疗Ⅱ组10只。正常对照组给予普通饲料喂养，模型组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组给予高脂饲料喂养；治疗Ⅰ组大鼠灌服补中益气丸水溶液，治疗Ⅱ组灌服经盐酸处理的补中益气丸水溶液，模型组与正常对照组组灌服生理盐水作为对照。
②采用分光光度法测定大鼠尿丙酮酸、乳酸、游离脂肪酸、尿素氮、尿NO代谢产物NO3-、ONOO-,脂质过氧化物MDA,GLU及AMY活性；通过凝集素(PSA、PNA)亲和沉淀法测定AMY凝集素结合率,并检测α-man活性，分析N-聚糖特点，并作统计学分析。
研究成果：
⑴模型一
模型组大鼠逐渐出现多饮、多食、多尿，体重下降等症状。补气活血法治疗后，症状有所改善，NO3-水平和AMY活性均显著升高，分别以RSA1、RSA2作用更明显，此外，RSA1仅升高S-Amy，而RSA2升高S-Amy和P-Amy；补气活血法治疗后，粪便GLU浓度明显降低，AMY PSA、PNA结合率、MDA、ONOO?有降低趋势，仅RSA2明显降低肠道ONOO-浓度。
⑵模型二
模型组大鼠逐渐出现多饮、多食、多尿，体重下降等症状。补中益气汤治疗后，症状有所改善，NO3-水平和AMY活性、α-man活性、AMY PSA、PNA结合率均显著升高；尿丙酮酸、尿乳酸、尿脂肪酸、尿素氮、MDA、GLU、ONOO-均有降低趋势。
研究结论：
⑴模型一
补气活血法能改善高脂饮食大鼠肠道AMY、N-糖链缺陷，升高AMY活性及NO3-水平，同时降低肠道GLU、MDA及ONOO-浓度，因而可能调节消化吸收及葡萄糖代谢，抑制自由基对肠道的损伤。不同比例补气活血中药，其作用效果有一定差异。
⑵模型二
补中益气汤可以改善2型糖尿病大鼠多饮、多食、多尿，体重下降等症状，对糖尿病大鼠的糖脂蛋白代谢紊乱、氧化应激及N-糖基化异常均有明显改善作用。补中益气汤对糖尿病大鼠的糖脂蛋白代谢紊乱、氧化应激及N-糖基化异常的改善可能主要通过改善脾胃的运化升清功能来实现的，即西医的改善胰岛素抵抗综合征。
本课题先采用高脂饮食制作代谢综合征模型来观察糖尿病前期征兆，来观察高脂饮食对葡萄糖水平、氧化应激及N-聚糖的影响；再采用高脂饮食联合小剂量腹腔注射STZ来制备2型糖尿病动物模型，进一步观察糖尿病时大鼠的葡萄糖水平、氧化应激、N-聚糖及糖脂蛋白代谢情况。然后通过对正常对照组、模型组、治疗组来分别观察补气活血药对高脂饮食引起的葡萄糖水平、氧化应激及N-聚糖变化的作用及补中益气汤对2型糖尿病大鼠葡萄糖水平、氧化应激、N-聚糖及糖脂蛋白代谢的改善作用。
研究方法：
⑴模型一
将雄性SD大鼠随机分为正常对照组，喂饲普通饲料；模型组，喂饲高脂饲料；补气活血1组（RSA1），2：1补气活血中药灌胃；补气活血2组（RSA2），1：2补气活血中药灌胃。采用分光光度法测定粪便NO代谢产物NO3-、ONOO-,脂质过氧化物MDA,GLU及AMY活性；通过凝集素(PSA、PNA)亲和沉淀法测定AMY凝集素结合率,分析AMY N-聚糖特点，采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法分析AMY酶谱，并作统计学分析。
⑵模型二
①从61只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组；剩下的SD大鼠用于造模，将造模成功的大鼠（72小时后空腹血糖值>16.7mmol/L）随机分为模型组10只、治疗Ⅰ组10只、治疗Ⅱ组10只。正常对照组给予普通饲料喂养，模型组、治疗Ⅰ组、治疗Ⅱ组给予高脂饲料喂养；治疗Ⅰ组大鼠灌服补中益气丸水溶液，治疗Ⅱ组灌服经盐酸处理的补中益气丸水溶液，模型组与正常对照组组灌服生理盐水作为对照。
②采用分光光度法测定大鼠尿丙酮酸、乳酸、游离脂肪酸、尿素氮、尿NO代谢产物NO3-、ONOO-,脂质过氧化物MDA,GLU及AMY活性；通过凝集素(PSA、PNA)亲和沉淀法测定AMY凝集素结合率,并检测α-man活性，分析N-聚糖特点，并作统计学分析。
研究成果：
⑴模型一
模型组大鼠逐渐出现多饮、多食、多尿，体重下降等症状。补气活血法治疗后，症状有所改善，NO3-水平和AMY活性均显著升高，分别以RSA1、RSA2作用更明显，此外，RSA1仅升高S-Amy，而RSA2升高S-Amy和P-Amy；补气活血法治疗后，粪便GLU浓度明显降低，AMY PSA、PNA结合率、MDA、ONOO?有降低趋势，仅RSA2明显降低肠道ONOO-浓度。
⑵模型二
模型组大鼠逐渐出现多饮、多食、多尿，体重下降等症状。补中益气汤治疗后，症状有所改善，NO3-水平和AMY活性、α-man活性、AMY PSA、PNA结合率均显著升高；尿丙酮酸、尿乳酸、尿脂肪酸、尿素氮、MDA、GLU、ONOO-均有降低趋势。
研究结论：
⑴模型一
补气活血法能改善高脂饮食大鼠肠道AMY、N-糖链缺陷，升高AMY活性及NO3-水平，同时降低肠道GLU、MDA及ONOO-浓度，因而可能调节消化吸收及葡萄糖代谢，抑制自由基对肠道的损伤。不同比例补气活血中药，其作用效果有一定差异。
⑵模型二
补中益气汤可以改善2型糖尿病大鼠多饮、多食、多尿，体重下降等症状，对糖尿病大鼠的糖脂蛋白代谢紊乱、氧化应激及N-糖基化异常均有明显改善作用。补中益气汤对糖尿病大鼠的糖脂蛋白代谢紊乱、氧化应激及N-糖基化异常的改善可能主要通过改善脾胃的运化升清功能来实现的，即西医的改善胰岛素抵抗综合征。