脑心通/PPARα信号抑制H2O2介导的心肌细胞凋亡、自噬

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脑心通是一个基于中医原则的复方制剂,已通过中国食品和药物管理局(CFDA)认证,在中国广泛用于治疗患者的脑血管和心血管疾病。但脑心通对活性氧(ROS)诱导的心肌细胞凋亡的保护机制仍不清楚。我们发现脑心通水提取物(WNXT)能够显著增加H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤的存活率,并且减少细胞凋亡数量。脑心通水提取物通过增加PPARα蛋白表达水平,从而上调MCL-1抗凋亡蛋白表达水平并抑制Bax和Bad促凋亡蛋白表达,最后抑制caspase-3和PARP-1凋亡信号的激活。由于坏死、凋亡和自噬是细胞死亡的三大主要方式,进一步发现WNXT/PPARα信号抑制H2O2诱导的H9c2心肌细胞自噬。取得显著性研究结果如下:1、利用MTT法检测发现脑心通水提物能够显著提高H9c2心肌细胞存活率,有抑制心肌细胞凋亡作用。2、脑心通水提取物进行了质谱分析、鉴定,发现有70多种药物活性成分,主要包括芍药苷(80.4%)、丹酚酸B(10.1%)、没食子酸(4.6%)、绿原酸(1.8%)、阿魏酸(1.5%)等12种药效成分。3、通过蛋白免疫印迹、TUNEL染色、流式、免疫荧光染色等方法证明了脑心通水提物抑制H2O2介导的心肌细胞凋亡。脑心通水提物显著抑制凋亡下游信号(caspase-3和PARP-1)激活,心肌细胞凋亡数量明显减少。4、研究发现PPARα基因沉默降低抗凋亡蛋白MCL-1表达量,并且使促凋亡蛋白Bax,Bad表达量升高,进而激活凋亡下游信号,明显增加心肌细胞凋亡数量。这些实验表明:脑心通水提物是通过PPARα信号依赖性的抑制H2O2诱导心肌细胞凋亡。5、H2O2显著诱导心肌细胞自噬,脑心通水提取物抑制H2O2介导的心肌细胞自噬。进一步发现脑心通/PPARα信号抑制H2O2诱导的心肌细胞自噬。
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