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Lhx3是LIM-HD家族转录因子,同时也是人类疾病相关基因。Lhx3在人类的垂体和神经系统中均有表达,临床研究发现Lhx3与先天性联合垂体激素缺乏症,颈椎僵硬,智力缺陷,先天性神经性听力损失,促肾上腺皮质激素不足和垂体低密度病变相关。临床上在病人中发现了LHX 的数十个突变,主要是单碱基突变造成的错义突变或无义突变,以及由剪接位点或片段缺失产生的突变。同时在小鼠中发现Pou4f3缺失小鼠Lhx3阳性细胞表达明显减少,这表明他们之间存在这相互作用关系,而Pou4f3在听力系统已被证明有着重要作用。而Lhx3在听觉系统中的作用及机制鲜少得到研究,基于此本课题以深入研究Lhx3功能的目的,鉴于Lhx3全敲除小鼠不能正常存活,我们构建了Lhx3G 报告小鼠和Lhx3loxp小鼠,并利用Cre-loxp系统实现了 Lhx3的条件性敲除。通过常用的PCR技术和免疫荧光技术等常用生物学技术,在小鼠视网膜,脊椎和内耳组织中进行了 LHX3和GFP的表达情况分析。通过P9,P15和P30三个时期视网膜中GFP和LHX3蛋白的共表达分析表明GFP蛋白与LHX3蛋白共同表达在双极细胞中;通过E13.5到E17.5五个时期脊椎中GFP和LHX3蛋白的共表达分析表明GFP蛋白与LHX3蛋白共同表达在运动神经元细胞中;通过E14.5到P0五个时期内耳中GFP和LHX3蛋白的共表达分析表明GFP蛋白与LHX3蛋白共同表达在耳蜗和前庭毛细胞中。综上我们发现GFP和LHX3蛋白在时空上具有相同的表达模式,因此成功构建了Lhx3GFP报告小鼠。同时,通过与GfilCre和Cmvcre小鼠杂交后我们分别检测到在耳蜗和脊椎中成功实现了 Lhx3的条件性敲除,且条件性突变小鼠生长发育正常,而全敲除小鼠不能正常存活,说明Lhx3loxp小鼠够建成功。Lhx3GFP报告小鼠和Lhx3lop小鼠的成功构建是开始后续Lhx3功能研究的第一步,至此我们得到了有力的工具来深入研究Lhx3的功能。