植物病毒病作为阻碍植物生长发育的第二大疾病,严重影响我国农业经济增长与发展。近年来,随着基因工程技术的发展,植物病毒病的防治效果显著,其中由病毒外壳蛋白(coat protein简称CP)介导植物获得相应病毒抗性的方法相对成熟且效果较好,然而由于植物病毒种类繁多,不同病毒CP基因介导抗性范围和效果也各不相同。本实验选择2017年首次被发现并报道的的赤爮花叶病毒(Thladianrha dubia mosaic virus简称ThDMV)的CP作为研究对象,以期为植物病毒病抗病研究添加新成员,同时为进一步了解ThDMV CP功能打下基础。本研究以野生赤爮叶片为材料提取总RNA,根据已有的ThDMV病毒序列设计特异性引物利用RT-PCR技术经琼脂糖凝胶电泳检测得到大小约为800bp的ThDMV CP基因目的条带,将目的基因纯化回收测序正确,获得ThDMV CP分离物。根据获得的 ThDMV CP 序列信息与 pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pGreen-35s多克隆位点信息,设计引物对ThDMV CP添加酶切位点,利用及BamHI和HindⅢ双酶切连接,成功构建重组植物内表达载体pCAMBIA1301-CP、pCAMBIA1300-CP、pGreen-35sCP。在农杆菌LBA404介导下,将ThDMV CP导入马铃薯叶片,利用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization 简称 FISH)、全组织杂交技术对 ThDMV CP 基因在植物叶片内进行定位分析发现ThDMV CP在植物内分布分散。进一步,以侵染重组植物内表达载体pCAMBIA1301-CP的植物叶片做实验材料进行粗酶液的提取,检测植物防御性酶(超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶POD、过氧化氢酶CAT)在观察5天内活性变化情况。结果显示:在观察的5天内,SOD、POD和CAT都有不同程度的升高,初步判断ThDMV CP对马铃薯的抗性具有一定作用。进一步,利用摩擦接种的方式对侵染重组植物内表达载体pCAMBIA1301-CP的植物接种PVY病毒,利用实时荧光定量PCR检测技术(Quantitative Real-time PCR简称QPCR)检测ThDMV CP介导的马铃薯对PVY具有一定抗性。