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目的:探讨不同锌离子浓度喂养孕鼠对子代腭胚突融合期细胞增殖的影响;观察不同锌离子浓度喂养孕鼠后Sp家族基因(Sp8、Sp5)的表达水平,验证Sp家族基因与腭裂发生的相关性,为后续研究锌在腭裂发生过程中的作用及机制奠定基础。方法:将孕鼠按饲料的锌离子浓度不同随机分为四组:常锌组(含锌30mg/kg)、缺锌组(缺锌饲料)、低锌组(含锌5mg/kg)、富锌组(含锌100mg/kg)。实验一:在ED14.5将孕鼠处死,用苏木精一伊红(HE)染色,镜下观察胎鼠腭部发育状况和形态,变化,选择良好的切片标本进行PCNA染色,观察子代腭胚突融合期细胞增殖情况,然后用标记指数(LI)分析。实验二:在ED14.5将孕鼠处死,在体式显微镜下剪取各组胚胎腭板,利用Real-Time PCR技术对其子代腭胚突进行研究,观察Sp8及Sp5基因的表达水平。结果:实验一:常锌组喂养胚胎数:39只,其中发生腭裂的有1只,死胎0只,腭裂发生率2.5%;缺锌组喂养胚胎数:38只,其中发生腭裂的有15只,死胎9只,腭裂发生率39.4%;低锌喂养组胚胎数:41只,其中发生腭裂的有12只,死胎5只,腭裂发生率29.2%;富锌喂养组胚胎数:48只,其中发生腭裂的有3只,死胎0只,腭裂发生率6.2%。ED14.5的胚胎HE染色显示:常锌组和富锌组的左右腭突均抬高并已经开始接触,然而缺锌组和低锌组的双侧腭突并未上抬或单侧腭突未上抬仍位于舌的两侧,部分切片发现腭突已经上抬但因为其短小而无法在腭中缝接触融合。PCNA染色观察细胞增殖:ED14.5的常锌组和富锌组的增殖细胞阳性率明显高于缺锌组和低锌组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验二:Real-Time PCR结果提示:ED14.5,与常锌组相比,缺锌组的腭突组织中Sp5m RNA的表达水平明显升高(P<0.05),Sp8m RNA的表达水平稍下降,但差异无统计学意义(P>0.05)。与常锌组相比,富锌组的腭突组织中Sp5m RNA的表达水平明显下降(P<0.05),Sp8m RNA的表达水平稍升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)微量元素锌的含量与子代腭裂的发生有着密切关系,锌的缺乏极易引起腭裂发生;(2)母鼠孕期缺锌会抑制胚胎腭突间充质(Embryonic palate mesenchymal,EPM)细胞增殖,致使腭突形态变异,上抬动力减弱,最终形成腭裂。(3)缺锌可致子代胚胎融合期Sp5表达升高,富锌对可致子代胚胎融合期Sp5表达下降,推测Sp5在调控腭的发育过程中起负性调节作用。