论文部分内容阅读
杜仲叶药材因其具有广泛的生理活性,已被《中国药典》(2005年版一部)收载。绿原酸是杜仲叶中主要活性物质之一,也是其高抗氧化性的主要功能组分之一；但在这类酚酸类化合物的提取分离中,目前主要采用醇提与树脂柱分离方式,存在分离所得目标组分纯度不高、柱污染严重、样品回收率低等问题。同时,因绿原酸等酚酸类物质易溶于水而不溶于脂类的性质,在多个领域的实际应用中受到限制,活性效能受到极大影响。本课题以杜仲叶为原料,以绿原酸为目标组分,建立了以微波辅助提取为基础、高速逆流色谱为依托的高纯度酚酸类物质的制备方法；同时在确保绿原酸功能活性的基础上,研究了增强其脂溶性的分子修饰方法。本课题主要研究内容和结果如下：(1)杜仲叶绿原酸提取工艺优化。在单因素试验结果分析的基础上,采用响应面分析法,优化最佳提取条件为：提取时间12min,微波功率420W,乙醇浓度75%和液料比30：1；在此条件下,绿原酸提取率为3.59±0.08%。与传统浸提法相比,提取率提高50%,与超声提取法相比,提取率提高8.2%。(2)高速逆流色谱分离杜仲叶绿原酸。通过对目标提取物在溶剂体系内分配系数的测定、两相溶剂体系分层时间的测定以及固定性保留率的考察,确定高纯度绿原酸分离纯化的HSCCC条件为：溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇一水(3：1：4),转速为900r/min,流速为2.0mL/min,温度为30℃。在此条件下,一步实现了纯度高达98.7%的杜仲叶绿原酸的分离纯化；较树脂分离具有纯度高、对柱体污染小、操作简单、重复性高、用时较短等优点。(3)月桂酰氯与绿原酸的分子修饰工艺优化。在单因素试验结果分析的基础上,采用正交试验优化最佳分子修饰工艺为：绿原酸/脂肪酰氯摩尔比为1：1,反应时间为8h,温度为35℃,催化剂三乙胺/绿原酸摩尔比为1.5：1,溶剂用量/绿原酸为20mL/g；在此条件下,修饰产物得率为91.51%；并通过IR和MS鉴定验证。(4)绿原酸及其分子修饰产物的脂溶性与抗氧化性评价。选取不同碳链长度的脂肪酰氯对绿原酸分子进行修饰,结果表明：反应所需的平衡时间与产物的脂溶性均与修饰基团的碳链长度成正相关,碳链愈长,反应达到平衡所需时间愈长,产物的脂溶性愈强；对比不同化合物的抗氧化性,结果为Vc>CGP(绿原酸棕榈酸酯)≈CGM(绿原酸肉豆蔻酸酯)>CGL(绿原酸月桂酸酯)>CGD(绿原酸癸酸酯)>CGA(绿原酸)；证明了该分子修饰法,在增加绿原酸脂溶性的同时未降低其抗氧化性。