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一、本文对比研究了化学发光酶联免疫分析(CLEIA)与酶联免疫分析(ELISA)技术检测水产品中呋喃唑酮代谢物(AOZ)和氯霉素(CAP)残留。结果显示:通过对两种药物残留检测证明, CLEIA分析方法线性范围和检测限均优于ELISA分析方法且两种免疫分析法的添加回收率具有很好的相关性。CLEIA检测AOZ检出限为0.01μg/kg,线性范围为0.01μg/kg~2.56μg/kg,检测CAP的检出限为0.016μg/kg,线性范围为0.025μg/kg~6.4μg/kg。ELISA法检测AOZ检出限为0.1μg/kg,线性范围为0.1μg/kg~1.62μg/kg;CAP的检出限为0.05μg/kg,线性范围为0.05μg/kg~4.05μg/kg。CLEIA法检测CAP批内RSD小于11.3%,批间RSD小于20.9%,检测AOZ批内RSD小于11.1%,批间RSD小于18.3%,符合《兽药残留酶联免疫试剂(盒)备案参考评判标准》的规定。二、应用CLEIA检测和监测了大连及周边地区几种水产品中CAP和AOZ残留。结果如下:(1)在2013年3、6、9和12月采集的样品中,大连地区魁蚶、仿刺参、菲律宾蛤仔、大连紫海胆和虾夷扇贝的食用组织未检测出呋喃唑酮代谢物(AOZ)。在2013年11月采集的样品中,庄河、营口和锦州地区几种食用贝类中AOZ未超标。(2)大连地区几种贝类不同时间检测结果显示,菲律宾蛤仔、魁蚶、虾夷扇贝三种贝类都不同程度检测出有氯霉素(CAP)残留。在3月的采集样品中,菲律宾蛤仔体内CAP平均含量为0.0893μg/kg;魁蚶体内CAP平均含量为0.069μg/kg;虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.0741μg/kg。在6月的采集样品中,菲律宾蛤仔体内CAP残留量平均含量为0.0907μg/kg;魁蚶体内CAP平均含量为0.061μg/kg;虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.0657μg/kg。在9月的采集样品中,菲律宾蛤仔体内CAP残留量平均含量为0.1166μg/kg;魁蚶体内CAP残留量平均含量为0.0676μg/kg;虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.072μg/kg。在12月的采集样品中,菲律宾蛤仔体内CAP残留量平均含量为0.1444μg/kg;魁蚶体内CAP平均含量为0.0693μg/kg;虾夷扇贝体内CAP平均含量为0.076μg/kg。菲律宾蛤仔体内CAP残留量有升高趋势,魁蚶、虾夷扇贝含量四季度变化不大。(3)庄河、营口和锦州几种食用贝类中检测出有氯霉素残留,庄河地区的縊蛏CAP含量为0.201μg/kg,虾夷扇贝CAP含量为0.108μg/kg,四角蛤蜊CAP含量为0.562μg/kg,紫石房蛤CAP含量为0.229μg/kg,太平洋牡蛎0.435μg/kg。营口地区的菲律宾蛤仔CAP含量为0.205μg/kg,中国蛤蜊CAP含量为0.298μg/kg,文蛤CAP含量为0.530μg/kg,栉孔扇贝CAP含量为0.107μg/kg。锦州地区的中国蛤蜊CAP含量为0.199μg/kg,魁蚶CAP含量为0.105μg/kg,菲律宾蛤仔CAP含量为0.810μg/kg。庄河地区的四角蛤蜊和太平洋牡蛎,营口地区的文蛤,锦州地区的菲律宾蛤仔等存在氯霉素残留超标现象。三、建立了一种应用分子印迹聚合物替代抗体测定氯霉素的直接竞争酶联免疫法。以氯霉素为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,乙腈为致孔剂,偶氮二异丁腈为引发剂采用沉淀聚合法合成氯霉素分子印迹聚合物。60℃下聚合反应20h,模板分子、功能单体、交联剂的摩尔比为1:4:20,模板分子的物质的量为0.25mmol,溶剂的量为35ml,引发剂的量为20mg时,合成的分子印迹聚合物对氯霉素的吸附效果最佳。合成的氯霉素分子印记聚合物具有高稳定性、强的特异吸附性、可重复使用等特点。将此印记聚合物作为氯霉素的人工抗体代替氯霉素试剂盒中的抗体,并与化学发光免疫检测方法联用来检测水产品种氯霉素的残留量。用0.1%聚乙烯醇甲醇与水溶液将氯霉素分子印迹聚合物固定在96孔板上。采用直接竞争反应模式,以辣根过氧化物酶作为标记物,以过氧化氢(H2O2)--鲁米诺(luminol)为发光体系,以氯霉素分子印迹聚合物捕获氯霉素,测量化学发光强度定量检测氯霉素。结果显示方法的线性范围为0.15~4.80μg/kg,线性方程为y=-3336.96x+18165.06,相关系数为0.98,检出限为0.10μg/kg,回收率在85.3%~92.6%之间,批内RSD小于9.2%,批间RSD小于16.6%。