背景:宫颈癌（Cervical Cancer,CC）是女性最常见的生殖系统恶性肿瘤,严重威胁女性健康。持续高危型人乳头瘤病毒（High Risk-Human Papillomavirus,HR-HPV）感染是宫颈上皮内瘤变（Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN）和宫颈癌发生的关键危险因素。长期的病毒感染会导致人体免疫微环境（Immune Microenvironment,IM）及T细胞受体（T Cell Receptor,TCR）库的改变,进而影响机体抗肿瘤免疫应答的质和量。肿瘤的免疫疗法乃基于诱导或重激活肿瘤特异性T细胞的原理所发展的一种治疗策略,该策略在其他癌种获得了较大的成功,但在宫颈癌中的疗效未达预期。因此,如何提高宫颈癌患者机体内的特异性T细胞应答的质和量并改善免疫疗法的疗效成为亟待解决的科学问题和临床难题,而上述问题的解决则有赖于对宫颈癌特异性T细胞的质和量的准确评估。目的:本课题旨在通过构建中国人通用的宫颈癌特异性抗原肽库,检测宫颈癌患者外周血以及肿瘤浸润的T淋巴细胞对该宫颈癌特异性抗原库的反应性,评估T细胞对抗原库的应答及强度与患者临床特征的关联性,探究导致不同T细胞反应的可能原因,亟望为准确评估宫颈癌的预后,以及预测、评估和改善宫颈癌免疫治疗的疗效奠定基础。方法:首先,本课题根据中国人群的高频人类白细胞抗原（Human Leukocyte Antigen,HLA）等位基因型别、借助免疫表位数据库（Immune Epitope Database,IEDB）和本课题组建立的预测算法（PBERT）筛选和建立适合中国人的通用型宫颈癌特异性抗原肽库,该抗原库涵盖了三个抗原肽库,分别为HR-HPV特异性抗原库（Mix1）、宫颈癌驱动基因突变抗原库（Mix2）和肿瘤相关抗原/癌睾抗原特异性抗原库（Mix3）。其后,收集宫颈癌患者外周血101例,女性健康对照（Healthy Controls,HC）外周血14例。应用IFN-γELISpot实验分别检测了宫颈癌患者和健康志愿者外周单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMC）对各个抗原库的反应性及反应强度,藉以评估抗原库的特异性;此后,结合患者的临床资料,分析T细胞反应性及强度与患者临床特征的关联性。最后,借助4例匹配的PBMC和肿瘤组织样本,应用上述方法比较了PBMC和肿瘤浸润的T淋巴细胞对特异性抗原肽库反应性及强度的差异。结果:1.成功建立了中国人群通用的宫颈癌特异性抗原肽库。该库覆盖了大部分中国人群高频HLA等位基因型别,并涵盖HR-HPV特异性抗原、宫颈癌驱动基因突变抗原和肿瘤相关抗原/癌睾抗原等宫颈癌特异性抗原。2.应用IFN-γELISpot技术检测和比较宫颈癌患者及女性健康对照PBMC对宫颈癌特异性抗原库的反应性,发现:健康对照PBMC对各个抗原库的特异性T细胞反应性及强度均显著低于宫颈癌患者PBMC,故该库可区分宫颈癌患者与健康对照。3.宫颈癌患者PBMC中特异性T细胞的检出率较高,且具有不同临床特征的患者PBMC对抗原库的反应性和强度存在差异,故检测PBMC对特异性抗原的反应性可为临床上评估患者的预后和治疗方案的疗效提供依据。4.肿瘤浸润T淋巴细胞亦存在针对该抗原库的特异性T细胞,且有反应性TIL克隆的反应强度远远高于PBMC。结论:成功建立了中国人群通用的宫颈癌特异性抗原库;本课题构建的宫颈癌特异性抗原库可用来准确区分宫颈癌患者和女性健康对照;宫颈癌患者PBMC以及肿瘤浸润的淋巴细胞中均存在宫颈癌特异性T细胞,且TIL中反应强度较高;检测PBMC对特异性抗原的反应性可为临床评估宫颈癌患者的预后和治疗疗效,以及开发新型的以T细胞为基础的免疫疗法来治疗晚期宫颈癌患者提供依据。