子宫颈和子宫内膜疾病是妇女甚为常见的疾病,其恶性病变宫颈癌、子宫内膜癌严重威胁着妇女的健康和生命。因此,探索一种简便易行、灵敏度高和特异性强的检测方法,对其早期诊断和治疗转归有重要意义。细胞表面的大分子糖蛋白CA125是目前公认的妇科肿瘤的相关标志物。自发现CA125以来,国内外学者主要把目光集中于血清CA125的研究,并已取得很好的成果。但随着临床实践的深入和经验的总结,发现血清CA125检测在子宫颈癌和子宫内膜癌诊断中的敏感性不高,特异性不强,因此,需要另辟临床诊断径路和方法,以弥补检测血清CA125诊断之不足。检测与肿瘤组织相关的体液(如唾液、胸水、腹水等)和组织学中的肿瘤标志物已被应用,虽然其敏感性和特异性均较检测血清中的肿瘤标志物为高,但其应用程度较低。CA125的异常升高,主要是由于富含CA125抗原的相关组织异常增生所致。由此,我们推测它在相关体液和组织中应可更为简便地、直接地检测出来,对诊断与之相关的疾病亦应较血清CA125更为敏感和特异。宫颈、阴道分泌物主要是宫颈腺体和子宫内膜腺体分泌的液体。根据其细胞生理学、解剖学特点,宫颈、子宫内膜病变细胞表面脱落的某些可溶性蛋白可能直接进入宫颈阴道分泌物中。因此,检测宫颈、阴道分泌物中的肿瘤标志物CA125的含量,可能比检测血清更加敏感。另一方面,宫颈、阴道分泌物的采集方法简便,无痛苦,安全,无创伤,可以反复采集检测,容易被患者接受。在临床工作中,我们发现CA125在宫颈、阴道分泌物中也有表达,并进行了预初实验,结果证实：在宫颈、子宫内膜良性和恶性的病变中,宫颈、阴道分泌物CA125有不同的表达和变化水平。有关宫颈、阴道分泌物中CA125的表达及其临床意义的研究,目前国内外尚未见报道,本课题旨在探讨宫颈、子宫内膜病变患者宫颈、阴道分泌物中CA125的表达,动态观察子宫内膜和宫颈良性和恶性病变时,宫颈、阴道分泌物中CA125水平的变化趋势,初步建立在宫颈、阴道分泌物中CA125水平正常和异常的临界值,从而为子宫内膜癌、宫颈癌的早期诊断、预后判断及复发追踪提供一个新的可靠的检测径路,特别是为子宫内膜癌和宫颈癌的早期发现和早期诊断提供更具敏感性和特异性的检测指标。第一部分正常生育期妇女宫颈和阴道分泌物CA-125的表达机制及其意义一研究内容与方法探讨肿瘤相关抗原CA125在正常生育期妇女宫颈分泌物、阴道分泌物和血清中的表达机制,探索宫颈、阴道分泌物中肿瘤标志物的初步检测价值。将147例2009年度职工体检中正常生育期妇女按年龄分为3组,组1(20-29岁)、组2(30-39岁)、组3(40岁以上),采用罗氏2010全自动电化学发光免疫分析法测定宫颈分泌物、阴道分泌物和血清CA125水平；147例中随机选取45例,收集正常宫颈标本28份,子宫内膜正常增殖期标本24份,分泌期内膜标本21份行CA125免疫组化测定。二结果1、CA125在96.4%的正常宫颈腺上皮细胞有表达,在正常子宫内膜腺体中表现为弱阳性,其局部表达水平与子宫内膜周期无关(P=1.000)。2、正常生育期妇女各年龄组间宫颈分泌物、阴道分泌物、血清CA125水平无差异(P=0.713,P=0.553,P=0.880)；3、147例宫颈分泌物、阴道分泌物、血清CA125三者之间表达水平有所不同(P=0.000)；4、正常值界值：阴道分泌物CA125为170U/ml,宫颈分泌物CA125为648U/ml,血清CA125为35U/ml。三小结CA125在正常生育期妇女的子宫内膜和宫颈腺上皮有表达,局部表达水平与内膜生理周期无关；CA125在正常生育期妇女宫颈分泌物、阴道分泌物中有表达,且明显高于血清中CA125浓度,可能更便于早期阴道和子宫疾病的检测。第二部分子宫内膜病变患者宫颈阴道分泌物CA-125的表达机制及其意义一研究内容与方法探讨子宫内膜及其相关疾病中,肿瘤相关抗原CA125在子宫内膜组织中的表达,以及在宫颈分泌物、阴道分泌物和血清中的表达机制；探索宫颈分泌物、阴道分泌物中肿瘤标志物的表达及其初步检测价值。正常生育期妇女147例为对照组；随机选取由于月经异常或不规则阴道流血来我院就诊的148例患者为研究组按病种分为6组：增殖期子宫组(n=24),分泌期内膜组(n=29),非功能性子宫内膜息肉组(n=24),单纯型增生过长组(n=24),复杂型增生过长组(n=21),内膜腺癌组(n=26)；采用罗氏2010全自动电化学发光免疫分析法测定对照组和研究组阴道分泌物、宫颈分泌物和血清的CA125水平。取研究组148例患者中分段诊刮或宫腔镜检查收集到的了宫内膜标本140例和随机抽取的我院近5年内97例子宫内膜腺癌和5例复杂型子宫内膜增生过长的石蜡标本,合共242例进行CA125免疫组织化学检查。二结果1、正常子宫内膜和单纯型增生过长的子宫内膜的CA125有弱阳性表达；非功能性息肉、复杂型增生过长的CA125表达明显增强,3种良性病变的内膜CA125表达有差异(χ2=41.055,P=0.000)2、子宫内膜癌组织CA125的表达强于良性病变,但病理分级Ⅰ、Ⅱ级的表达强阳性表达率高于Ⅲ级(χ2=15.635,P=0.000)；3、随着子宫内膜从良性病变向恶性病变的演变,宫颈分泌物、阴道分泌物CA125的表达逐渐增高,子宫内膜癌增高明显；4、子宫内膜癌组的血清CA125与正常界值上限值比较无差异；而阴道、宫颈分泌物与界值比较有差异(阴道分泌物t=4.408,P=0.000,宫颈分泌物t=4.262,P=0.000)：5、阴道分泌物与宫颈分泌物CA125诊断子宫内膜癌的检测的敏感性高于血清(Q=18.421,P=0.000)；特异性方面具有一定的差异(Q=8.000 P=0.018)。宫颈分泌物CA125的敏感性和特异性均较高。三小结CA125在子宫内膜及其相关疾病妇女的宫颈分泌物、阴道分泌物中CA125的表达明显高于在血清中的表达水平。随着子宫内膜从良性病变向恶性病变的演变,宫颈分泌物、阴道分泌物中CA125的水平逐步升高。宫颈分泌物CA125的敏感性和特异性均高,是较理想的早期检测子宫内膜癌的肿瘤标志物。第三部分宫颈病变患者宫颈阴道分泌物CA125的表达机制及其意义一研究内容与方法初步探讨肿瘤相关抗原CA125在各类宫颈病变组织中的表达机制,探索宫颈分泌物、阴道分泌物中肿瘤标志物的初步检测价值。正常生育期妇女147例为对照组；临床诊断宫颈病变需行宫颈病灶活检或手术切除子宫的105例患者为观察组,分为5组：CINⅠ-Ⅱ(n=62)、CINⅢ(原位癌)(n=21)、浸润性宫颈癌(n=15)、高分化宫颈腺癌(n=4)、低分化宫颈腺癌(n=3)。同时随机选取对照组中28例正常宫颈标本设为临床病理对照组。采用CA125单克隆抗体进行免疫组化分析,观察CA125在各组病变组织中的表达位点。CA125定量分析采用电化学发光免疫分析法测定观察组、正常对照组阴道分泌物、宫颈分泌物和血清CA125水平。二结果1、观察组与对照组相比较,在腺体及增生上皮细胞,腺上皮细胞游离缘表达阳性率无差异,在腺腔及异形增生性细胞／肿瘤细胞有差异分别为χ2=5.265P=0.032,χ2=20 P=0.000)；2、CA125在异形增生鳞状细胞／肿瘤细胞中的表达,随着浸润程度或分化程度增加而减弱。3、正常宫颈组织主要呈低度表达,宫颈病变组织主要呈高度表达。4、观察组宫颈、阴道分泌物CA125平均水平分别是746.75±182.48、180.92±69.069 U/ml,与对照组比较有差异(P=0.000)。5、CINⅠ-Ⅱ组手术治疗后随访,阴道分泌物CA125平均水平为117.53±14.79U/ml,,与术前比较有差异(t=16.313,P=0.000)。6、阴道分泌物与宫颈分泌物检测的敏感性明显高于血清(Q=30.000,P=0.000),特异性也有一定的差异(Q=8.000,P=0.018)。宫颈分泌物CA125的敏感性和特异性均高,是较理想的检测早期宫颈恶性病变的肿瘤标志物。三小结CA125在宫颈病变及宫颈正常组织中均有表达。随着宫颈上皮从轻度不典型增生向中、重度不典型增生发展,宫颈、阴道分泌物CA125的表达逐步增强,从CINⅢ(原位癌)进展到浸润性宫颈癌,宫颈、阴道分泌物CA125的表达，又随着肿瘤浸润程度或分化程度增加而减弱。在宫颈恶性病变的早期检测中,宫颈分泌物检测的敏感性和特异性均较强。测定宫颈、阴道分泌物CA125有助于宫颈病变的早期诊断、疗效判断和复发追踪。全文结论1、CA125在正常生育期妇女、子宫内膜相关疾病以及宫颈病变患者的宫颈分泌物、阴道分泌物中有表达,明显高于血清中CA125浓度。2、随着子宫内膜从良性病变向恶性病变的演变,宫颈从CINⅠ-Ⅲ的发展,宫颈分泌物、阴道分泌物中CA125的水平逐步升高；从CINⅢ(原位癌)进展到浸润性宫颈癌,宫颈、阴道分泌物CA125的表达又随着肿瘤浸润程度或分化程度增加而减弱。3、在宫颈早期恶性病变、子宫内膜恶性病变的早期检测中,宫颈分泌物检测的敏感性和特异性均较强。测定宫颈、阴道分泌物CA125有助于子宫内膜病变和宫颈病变的早期诊断、疗效判断和复发追踪。