PI3激酶在KIT二次突变介导的耐药中的作用研究

来源 :宁夏医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pollyzhang15
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目的:探讨PI3激酶在KIT二次突变介导的胃肠间质瘤靶向治疗耐药中的作用。方法:通过点突变在逆转录病毒载体上构建胃肠间质瘤中常见的KIT一次突变和二次突变的表达质粒,转染包装细胞,然后用包装细胞分泌的病毒感染BaF3细胞建立稳定表达KIT的细胞系。用PI3激酶抑制剂以及KIT抑制剂干预KIT表达细胞,检测KIT及其下游信号通路的活化。活细胞计数法和凋亡细胞检测试剂盒检测KIT表达细胞在抑制剂干预下的增殖和存活,以阐明PI3激酶在KIT二次突变介导的靶向治疗耐药中的作用。结果:1.KIT二次突变显著增强了其自身的活化;2.PI3激酶与KIT的结合对KIT二次突变的自活化起关键作用,并且该作用不被PI3激酶抑制剂所抑制;3.在失去与PI3激酶的结合后,KIT二次突变的活化对胃肠间质瘤靶向治疗药物伊马替尼的敏感性显著增加;4.在失去与PI3激酶的结合后,KIT二次突变介导的细胞增殖和存活被伊马替尼抑制。结论:1.PI3激酶在耐药性胃肠间质瘤携带的KIT二次突变的活化及其介导的细胞存活和增殖、以及对靶向药物伊马替尼的反应性起关键作用;2.PI3激酶可能成为治疗耐药性胃肠间质瘤良好的靶点。
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