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互叶白千层(Melaleuca alternifolia)是桃金娘科(Myrtaceae)白千层属(Melaleuca L.)植物,原产于澳大利亚新南威尔士州及新西兰的部分地区。上世纪90年代,我国广东、广西、海南等沿海地区成功引种该树种并形成了较大的种植规模,如在广西的玉林、钦州、邕宁等地均有大面积的种植基地和精油提炼工厂,资源十分丰富。目前关于互叶白千层的研究多集中在植物栽培及其挥发油——茶树油的研究上,而该植物非挥发油部位的化学基础研究国内外相关报道较少。本课题对互叶白千层的枝叶、茎干进行了系统化学研究,分离并鉴定出21个化合物,并对互叶白千层枝叶的粗提物进行了药理活性研究;同时选择分离得到的酚酸类化合物没食子酸为原料,以具有苯磺酰结构的磺胺类药物作为合成子,合成系列的没食子酸衍生物,并对此系列衍生物的促软骨细胞增殖的体外活性进行了实验研究,具体内容如下:1.对互叶白千层的枝叶、茎干部位进行系统的化学成分研究,分别进行了石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位的分离提取。各部位经反复硅胶、Sephadex LH-20等柱层析,以及重结晶纯化,并利用理化与波谱分析技术,分离鉴定出21个化合物,分别为正二十九烷醇、三十二醇、三十四酸、β-谷甾醇、对香豆酸三十酯、咖啡酸三十酯、3-甲氧基-4-羟基-肉桂酸三十脂、胆甾醇、白桦脂酸、白桦脂醇、乌苏-12(13)-烯-3-酮-28-羧酸、3β-O-乙酰氧基-11(12)-烯-乌苏烷-28,13β-内酯、3β-O-乙酰氧基-11α,12α-环氧-齐墩果烷-28,13β-内酯、熊果酸、3-0-乙酰熊果酸、α-香树脂醇咖啡酸酯、槲皮素、山奈酚、没食子酸、没食子酸乙酯、原儿茶酸。2.对互叶白千层醇提物、水提物进行了抗炎抗菌的药理研究:采用巴豆油致小鼠耳廓肿胀法、微量2倍稀释法、小鼠热板法、小鼠被动皮肤过敏试验等试验方法研究互叶白千层粗提物的药理作用,并进行了急性毒性试验。结果表明互叶白千层的醇提物能抑制由巴豆油引起的小鼠耳廓肿胀;提高小鼠热刺激疼痛的痛阈值;对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、表皮葡萄球菌有较强抑菌作用;能抑制小鼠被动皮肤通透性;互叶白千层醇提物的半数致死量(LD50)为50.90g/kg。互叶白千层水提物同样具有上述药理活性,此外,在抑菌试验中,水提物还表现出对大肠埃希杆菌有较强抑菌作用;互叶白千层水提物还可增加豚鼠耐受磷酸组胺的致痒阈;互叶白千层水提物的最大给药量为225.62g/kg。3.以没食子酸为原料,与含苯磺酰胺结构的磺胺类药物反应,共合成13个化合物,用1H-NMR、13C-NMR及MS对合成的衍生物进行结构确证。4.体外培养兔关节软骨细胞,在不同组间加入不同浓度的上述13个没食子酸衍生物。通过MTT法检测给药不同浓度的没食子酸衍生物后软骨细胞增殖的情况;采用伊红(HE)染色、番红O-快绿染色、Hoechst 33258染色、钙黄绿素/PI染色观察不同药物浓度下软骨细胞的特性变化;采用RT-PCR法测定细胞中糖胺聚糖、Ⅰ型和Ⅱ型胶原基因、X型胶原基因及Sox9基因的表达,观察给药没食子酸衍生物后软骨细胞的生物特性变化。实验结果表明没食子酸衍生物1、7～11在体外有促进软骨细胞增殖的作用。5.采用Autodock vina 1.1.2软件对合成的13个没食子酸衍生物进行了分子对接研究,衍生物1、7～11对ADAMTS-5均呈现出强的亲和力。