【目的】细胞膜离子通道的活动特性与神经元的功能变化直接相关。本论文研究了生物碱类药物Vinpocetine对新生大鼠海马CA3区锥体神经元全细胞电流、全细胞钾电流、瞬时外向钾电流和全细胞钙电流特性的影响,为Vinpocetine的神经保护作用提供在离子通道水平上的实验支持。【方法】研究对象是应用酶消化和机械吹打方法相结合,急性分离的新生大鼠海马CA3区锥体神经元。应用膜片钳技术记录海马CA3区锥体神经元在不加药情况下和Vinpocetine作用下的全细胞跨膜总电流、全细胞外向钾电流、瞬时外向钾电流和全细胞钙电流及其变化。应用软件Clampfit9.0和Igor5.01对瞬时外向钾电流和全细胞钙电流进行动力学特性分析。【结果】急性分离得到的新生大鼠海马CA3区单个锥体神经元胞体清晰、轴突明显、表面光洁、立体感强、贴壁状态良好。对Vinpocetine作用下和不加药时细胞膜离子通道特性的研究结果如下:1.不加药时,全细胞跨膜总电流中既有内向电流成分又有外向电流成分,内向电流表现出快速激活快速失活的特性,外向电流则表现为快速激活缓慢衰减的特性。加入Vinpocetine后,全细胞电流表现为:开始时电流降低速度较快,5min后作用基本上达到稳定。Vinpocetine对全细胞电流作用呈浓度依赖性和时间依赖性,作用时间越长,抑制作用越强,药物浓度越大,抑制作用越强。2.未加药时,全细胞钾电流特征典型,在-30mV左右被激活,随着激活电压升高,激活电流不断增大。加入Vinpocetine后,全细胞钾电流对Vinpocetine的浓度依赖效应不明显,但高浓度的Vinpocetine对全细胞钾电流具有很强的抑制作用。50μmol/L Vinpocetine将全细胞钾电流减小了74%,而没加Vinpocetine时的全细胞钾电流减小率仅为32.1%。3.未加药时,全细胞瞬时外向钾电流具有快速激活、快速失活的特性,激活电压在-20mV左右。Vinpocetine对瞬时外向钾电流有增强的作用,且具有浓度依赖性,浓度越大,瞬时外向钾电流越大。瞬时外向钾电流的失活动力学曲线在Vinpocetine作用下左移。4.未加药时,全细胞钙电流在-40mV左右被激活,在0mV处达到电流最大值,具有缓慢失活的特性。Vinpocetine对全细胞钙电流具有减弱作用,且具有时间依赖性,在加药5min后减弱作用趋于稳定;全细胞钙电流抑制作用具有浓度依赖性;全细胞最大激活钙电流在加药后仍出现在0mV激活电压处;全细胞钙电流失活动力学曲线在加入Vinpocetine后曲线下移,但起点不变。【结论】通过研究Vinpocetine对新生大鼠海马CA3区锥体神经元离子通道电流特性的影响,得出结论如下:1.Vinpocetine对全细胞电流具有抑制作用,其作用具有时间依赖性和浓度依赖性。2.Vinpocetine对全细胞钾电流具有抑制作用,其作用也具有时间依赖性和浓度依赖性。3.Vinpocetine对瞬时外向钾电流具有增强作用,且具有浓度依赖性,瞬时外向钾电流的失活动力学曲线在其作用下左移,提示我们Vinpocetine可能通过增强瞬时外向钾电流而具有神经保护作用。4.Vinpocetine抑制全细胞钙电流且具有时间依赖性和浓度依赖性,并使全细胞钙电流失活动力学曲线下移,高浓度Vinpocetine可能通过抑制钙电流起到神经保护作用。5.Vinpocetine对细胞膜离子通道具有不可忽视的作用,但其在针对离子通道方面的药用价值还需要进一步的实验研究。