【摘 要】
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白细胞介素12(IL-12)是免疫反应中起关键作用的细胞因子,是沟通天然抵抗力与后天获得性免疫力的桥梁,被誉为免疫系统行使抗病毒、抗肿瘤的核心调控因子。 在获得高效表
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白细胞介素12(IL-12)是免疫反应中起关键作用的细胞因子,是沟通天然抵抗力与后天获得性免疫力的桥梁,被誉为免疫系统行使抗病毒、抗肿瘤的核心调控因子。
在获得高效表达IL-12工程细胞的基础上,本文从含血清培养到减少培养基中的血清含量以及无血清培养,进行了多种探索。从减少临床应用风险以及便于下游纯化过程考虑,最终选定了限定化学成分的CDCHO培养基,驯化表达rhIL-12的工程细胞,获得了完全适于在CDCHO培养基中传代、悬浮培养的表达rhIL-12的工程细胞株。进一步研究了从静止培养到滚瓶培养,再至7.5升发酵罐培养,建立了适于规模化生产的表达rhIL-12的工程细胞中试培养工艺。最终实现了工程细胞在发酵罐中的高密度培养,不但收液速度快,而且培养上清中目的蛋白的浓度得到大幅度提高,从滚瓶培养的3-5mg/L提高到发酵罐生产的10-20mg/L,大大提高了生产效率。
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