【摘 要】
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研究背景及目的据GLOBOCAN 2020最新统计,胃癌已成为全世界最常见的癌症之一,严重威胁着国人的身体健康,给国家和社会增加了巨大的经济负担。根据中国胃肠肿瘤外科联盟数据结果显示,我国胃癌患者分期主要以进展期为主,约占全部胃癌患者的80.3%。近年来,随着我国对胃癌筛查的逐步重视,早期胃癌患者比例逐年增加,预后相对较好。对于早期胃癌无淋巴结转移者,在符合适应证的前提下可行内镜下EMR或ESD手
【基金项目】
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广东省科技计划项目（2017B20226005）；
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研究背景及目的据GLOBOCAN 2020最新统计,胃癌已成为全世界最常见的癌症之一,严重威胁着国人的身体健康,给国家和社会增加了巨大的经济负担。根据中国胃肠肿瘤外科联盟数据结果显示,我国胃癌患者分期主要以进展期为主,约占全部胃癌患者的80.3%。近年来,随着我国对胃癌筛查的逐步重视,早期胃癌患者比例逐年增加,预后相对较好。对于早期胃癌无淋巴结转移者,在符合适应证的前提下可行内镜下EMR或ESD手术,创伤更小、对胃功能的影响更小,极大的减轻了患者的经济负担和精神压力。然而,对于伴有淋巴结转移的早期胃癌患者,单纯内镜下切除显然是不足的,正因如此,预测早期胃癌有无淋巴结转移是指导临床合理选择手术方式的重要前提与依据。研究方法:研究对象为南方医科大学南方医院普外科2018年1月至2020年12月期间在南方医院住院并手术的早期胃癌患者,术后病理均确诊为早期胃癌。随后检测患者DNA甲基化状态,并根据患者的最终病理是否有淋巴结转移进行分组,然后通过相关数据分析,并分析相关甲基化位点的基因,建立早期胃癌甲基化差异图谱,同时通过组织DNA甲基化检测来区分早期胃癌患者伴/不伴淋巴结转移的甲基化标志物的差异,以此来探索伴/不伴淋巴结转移的早期胃癌基因甲基化状态,以期通过甲基化检测来预测早期胃癌患者发生淋巴结转移的风险;进一步将筛选出的甲基化位点对早期胃癌淋巴结转移进行单因素及多因素分析,同时利用TCGA数据库分析差异性位点与胃癌患者预后的相关性。结果:收集的100例早期胃癌的癌组织中,其中20例淋巴结转移（LN+）患者原发灶和癌旁样本,80例淋巴结非转移（LN-）患者原发灶和癌旁样本。我们将这些标本进行了 100个全基因组高通量（EPIC）建库和DNA-seq。通过对20个LN+和80个LN-的样本进行测序分析、文库构建、火山图、热图及诊断能力分析后发现,LN+和LN-的组织样本存在差异CpG位点。单因素分析结果T分期（P=0.02）、脉管神经浸润（P=0.023）、GNAS甲基化表达（P=0.001）是早期胃癌LN+的危险因素。多因素分析中,T分期（HR=9.906,95%CI:1.48～60.15,P=0.048）、脉管浸润（HR=20.035,95%CI:1.64-240.77,P=0.032）及GNAS（HR=33.620,95%CI:3.25～322.2,P=0.006）为早期胃癌发生淋巴结转移的危险因素,表明GNAS、T分期、脉管浸润均可以提示早期胃癌发生淋巴结转移。通过TGCA数据库进行生存分析后发现,GNAS在早期胃癌中高表达,患者总生存期缩短,反之,患者总生存期提高,这项结果表明GNAS在早期胃癌中作为一种不良的预后存在。结论:（1）基于二代测序技术（NGS）的DNA甲基化基因检测可以区分早期胃癌淋巴结转移与否,LN+和LN-患者肿瘤组织存在差异CpG位点;（2）胃癌组织中发现GNAS基因甲基化在早期胃癌组织淋巴结是否转移中表现出显著差异性,表明GNAS基因与早期胃癌是否发生淋巴结转移存在显著相关性;（3）单因素及多因素分析发现GNAS均为早期胃癌发生淋巴结转移的危险因素,通过TGCA数据库分析也揭示了 GNAS提示着不良的预后,预示着GNAS在预测早期胃癌不良预后中具有很高的应用价值。
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