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一、沙棘籽渣黄酮类化合物对人肿瘤细胞凋亡的影响 1．沙棘籽渣黄酮类化合物对人乳腺癌Bcap-37细胞凋亡的影响 目的：研究沙棘籽渣黄酮类化合物(flavonoids from seed residue of Hippophae rhamnoides L.,FHR)对人乳腺癌细胞Bcap-37生长抑制和细胞凋亡的诱导效应。为进一步研究FHR抑癌和诱导肿瘤细胞凋亡的机理提供实验依据。方法：将不同浓度的FHR作用于人乳腺癌Bcap-37细胞，若干时间后，分别采用MTT法、Wright染色法、透射电镜观察超微结构、原位末端标记法(TUNEL)及流式细胞术，研究FHR对Bcap-37细胞的生长抑制和细胞凋亡的诱导效应。结果：FHR在10～1000 μg／mL等浓度范围内可以诱导人乳腺癌细胞Bcap-37产生生长抑制和细胞凋亡的特征性变化。MTT比色法研究发现，FHR在200 gg／mL、400μg／mL、600μg／mL、800μg／mL、1000μg／mL的浓度下，细胞生长均受到不同程度的抑制，这一抑制作用随FHR浓度的升高而增强。并且浓度与生长抑制率(Inhibitory rate)呈现明显的依赖效应，1000μ/mL实验组抑制率达75.1％；Wright染色结果显示，Bcap-37经FHR作用后细胞逐渐变圆，体积缩小，胞浆浓缩，胞核着色较深且固缩碎裂，折光性增强，胞膜表面有芽状突起(凋亡前期状态)，显示出典型的凋亡症状和趋势；透射电镜结果发现，经FHR为500μg/mL、200 μg／mL和100 μ/mL作用的Bcap-37细胞，细胞核缩小，其形态扭曲并出现中文摘要断裂，且结构不完整，呈碎裂状，染色质凝集成不规则团簇，核仁消失，细胞浆普遍出现空泡，对照组核膜与细胞膜仍保持完整，核内染色质分布均匀;TUNEL结果发现，随着FHR浓度(100陀/mL，200林g/mL，500林g/mL)的增加，Bcap一37细胞的胞核区域的荧光强度逐渐加强，在500陀/mL组，绿色荧光分布于整个细胞，且细胞形态呈葡萄串状，同时细胞结构趋显萎缩。阴性对照组Bcap一37细胞，几乎无荧光显示，或呈现微弱的亮度。而阳性对照组Bc即一37细胞的细胞核在整个视野中有强烈的绿色荧光;流式细胞术结果显示，FHR浓度为1000林g/mL，作用一Be即一37细胞24h、48h和72h后，可使Bc即一37细胞的细胞周期受阻于GO/GI和GZ从期，并诱导其发生细胞凋亡，此外，FHR实验组在作用24h，48和72h后其凋亡指数比相应时间段对照组显著升高。结论:体外检测表明，FHR对人乳腺癌细胞BcaP一37具有诱导细胞凋亡的效应。