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近年来胡椒因其生物化学特性及药用价值,引起了人们的广泛关注。胡椒不仅可以作为香料和调味料,还有非常重要的药用价值,如抗菌消炎、抗肿瘤、保肝护肝、祛风退热、健胃等,据大量文献报道,胡椒中的活性成分主要是酰胺类化合物,其中尤以胡椒碱活性最强含量也最多。目前胡椒中酰胺类物质的传统提取分离方法繁杂,需要结合多重分离方法,操作繁琐且很难获得高纯度的化合物,故建立一套快速高效的分离纯化方法将具有重要意义。本研究采用高速逆流色谱技术结合Sephadex LH-20和制备液相色谱,从海南黑胡椒中分离出多种单体。具体方法如下：6kg胡椒粉经85%乙醇萃取后加乙酸酸化,氯仿萃取除去非生物碱类杂质后,用氨水处理成碱性,然后用氯仿提取总碱得氯仿相,减压浓缩后得到105g氯仿相样品用于后续化学成分的分离。氯仿相采用溶剂系统石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(1：3：1.5：1,v/v),通过柱容积为1200mL的高速逆流色谱进行分离,得到FrA-FrG七组组分,其中FrE为单一的纯净化合物E,纯度达99.26%,FrD和FrF经制备型高效液相色谱纯化后分别得到单体化合物D和F,其余组分经过Sephadex LH-20结合制备液相色谱纯化,最终又分别得到10个单体化合物A1、A2、B1、B2、B3、B4、C1、C2、C3和G1,对得到的这13个化合物采用质谱和1H-NMR、13C-NMR等核磁共振技术进行了结构鉴定。它们分别是：Retrofractamide-A (A1)、N-isobutyl-(2E,4E)-decadienamide (A2)、 Retrofractamide-C (B1)、piperoleine A (B2)、(2E,6E)-7-(1,3-benzodioxol-5-yl)-1-(piperidin-1-yl)hepta-2,6-dien-1-one (B3)、Retrofractamide-B (B4)、piperoleine B (C1)、pipernonaline (C2)、pipercyclobutanamides A (C3)、Dehydropipernonaline (D)、 Piperine (E)、(2E,4E,14Z)-N-Isobutyleicosa-2,4,14-trienamide (F) N-isobutyl-(2E,4E,12Z)-octadecatrienamide (G)。选择化合物A1、B1、B4、C2、D和E进行细胞体外增殖抑制试验,结果表明受试物对正常细胞J744.1小鼠腹腔巨噬细胞毒性较弱,IC50均大于100μg/ml；对人肺癌801D细胞均表现出较强的抑制作用,IC50为5-42μg/ml。其中含有异丁基基团的化合物A1、B4和C2的抑制作用最强,初步推断该类化合物中的异丁基基团能够增强对人肺癌801D细胞的抑制活性。