【摘 要】
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研究背景和意义癌基因诱导的细胞衰老（Oncogene-induced senescence,OIS）是当今衰老和癌症研究领域的一个重要热点。SAHF（senescence-associated heterochromatic foci）在OIS的发
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研究背景和意义癌基因诱导的细胞衰老（Oncogene-induced senescence,OIS）是当今衰老和癌症研究领域的一个重要热点。SAHF（senescence-associated heterochromatic foci）在OIS的发生和维持中具有核心地位,因此,SAHF形成的机制是目前OIS研究中最受关注的问题之一。普通异染色质,其紧密折叠结构具有解散的潜力,而SAHF紧密折叠结构具有不可逆转性,导致这一现象的机理尚不明确。基于我们前期的研究和最新的结果,我们推测在衰老的细胞中存在BRG1-HP1-H3K9me复合物,而该复合物是SAHF形成的核心元件,能使SAHF紧密折叠不可逆转。研究方法与结果在本研究中,我们通过表达H-RASG12V诱导了细胞衰老,通过免疫荧光染色,我们发现在RAS过表达的细胞中BRG1、HP1和H3K9me共定位,且都存在于SAHF中。免疫共沉淀实验结果也显示,在RAS激活细胞中,BRG1、HP1和H3K9me之间的相互作用显著增强。此外,GST-Pull down的结果证实BRG1和HP1以及H3K9me之间存在相互作用。在此基础上,我们通过过表达BRG1（295-634AA）或者BRG1（1223-1420AA）竞争性地抑制BRG1-HP1-H3K9me复合物的形成,进而抑制了RAS诱导的SAHF的形成。证明了BRG1-HP1-H3K9me复合物是SAHF形成的核心结构。结论本研究证实了RAS诱导的衰老细胞中存在BRG1-HP1-H3K9me蛋白复合物,这些复合物是SAHF形成的核心元件。这些结果将有助于推进SAHF形成的机制研究,并帮助研究人员深入了解复杂的OIS过程。
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