小鼠心脏移植中经冠脉系统转基因的研究

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目的 随着基因工程,尤其是转基因技术的发展,将外源基因转入移植心脏,治疗移植后的缺血-再灌注损伤和免疫排斥反应,以减少使用免疫抑制剂,成为研究的热点。本试验试图通过将报告基因(Lac-Z基因)转入移植心脏并表达,来证明将外源基因转入移植心脏进行基因治疗的可行性。方法 首先建立小鼠异位心脏移植模型,建立经冠状动脉系统灌注技术。再将12只BAIB/C近交系小鼠随机分为转基因组和空白对照组,各6只。转基因组经冠脉将质粒载体(PSV-β-gal)/脂质体(DOSPER)灌注入移植心脏;对照组则灌注生理盐水。术后3天收取心脏,冰冻切片,经X-gal组织化学染色检测Lac-Z基因的转染和表达情况。结果 转基因组的3例都检测到Lac-Z基因的表达。其中有两例,其Lac-Z基因表达位于心室壁中层的心肌内,呈点状兰斑;有一例,其表达位于心外膜下的心肌内,呈片状兰斑。而对照组则未检测到Lac-Z基因的表达。结论 以质粒表——达载体旭质体的形式,经冠脉灌注方式,把外源基因转入移植心脏是可行的。本试验为心脏移植后缺血-再灌注损伤和免疫排斥反应的基因治疗的可行性提供了依据。
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