我国间日疟原虫SSUrDNA特定片段体外扩增、序列变异分析及检测的研究

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疟疾是严重危害人类健康的重要寄生虫病,其防治工作一直为国际医学界所关注。随着亚单位疫苗、抗疟新药及分子诊断技术等研究的不断深入,疟原虫种内变异问题已日益引起人们的重视,同一虫种不同虫株在生物学、免疫学性质及某些分子表型和基因型特征等方面所表现出的差异,直接关系和影响到防治效果。因此,分析虫株变异、特别是分子水平的变异现象,探索变异规律,将为进一步研究有效的防治手段提供科学依据。rDNA是生物细胞中最为保守的结构基因,在进化过程中,不同种、属真核生物rDNA结构保持相对一致,部分序列较为稳定,常显示出高度的保守性和广泛的异种同源性,同时部分序列因核苷酸的转换、颠换、缺失或插入的速率并不一致,而形成了序列的改变,显示出种间和种内的差异。现有研究表明,rDNA及其表达产物rRNA不仅是寄生虫基因变异分析、种株分类的重要标志,同时也是寄生虫病原检测的理想靶物。目前,有关人体疟原虫rDNA研究,国外仅发表了P.f、P.v、P.m单一虫株的SSUrDNA、5.8SrDNA编码区序列,报道了以SSUrRNA为靶的核酸探针斑点杂交和针对SSUrDNA特定片段的PCR扩增结合Southern印迹杂交检测P.f的研究。迄今尚未见到国内外有关人体疟原虫rDNA序列水平的种内变异分析和以SSUrDNA为靶的检测P.v的研究报道。 本实验根据已知人体疟原虫(P.falciparum、P.vivax、P.malariae)、动物疟原虫(P.berghei、P.lophurae)、组织或血液内其它原
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