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背景及目的人类乳头状瘤病毒（human papillomavirus, HPV）是导致宫颈癌的主要因素之一。目前普遍认为HPV感染宿主细胞后基因发生整合，其编码的癌蛋白E6能直接或间接激活端粒酶，通过一系列生物学调控，如细胞周期或凋亡使细胞免于死亡，并向癌细胞转化。人端粒酶逆转录酶（human telomericreverse transcriptase, hTERT）与人端粒酶RNA组分（human telomeric RNAComponent, hTERC）是端粒酶的最重要两个亚基，端粒酶的活化依赖两者的表达。本实验通过免疫组织化学SupervisionTM二步法检测hTERT与HPV16/18E6蛋白表达，采用荧光原位杂交技术（fluorescent in situhybridization, FISH）检测宫颈组织中hTERC基因扩增情况。旨在分析三者之间以及与宫颈癌发生的关系，以提高宫颈癌前病变的预后评估水平。材料与方法1、选取广西医科大学第一附属医院病理科2008年5月至2013年7月宫颈组织存档蜡块共235例，分为6组：慢性宫颈炎组（因子宫肌瘤且宫颈无瘤变而行子宫全切的手术标本）34例、宫颈上皮内瘤变（Cervical IntraepithelialNeoplasia; CIN）Ⅰ级35例、CINⅡ级23例、CINⅢ级25例、宫颈鳞状细胞癌组101例及腺癌组17例。患者年龄21~73岁，平均45.40岁，实验纳入病例均为病理确诊病例。2、采用SupervisionTM二步法对所有组织标本进行hTERT与HPV16/18E6的免疫组织化学染色。3、采用FISH技术检测hTERC基因扩增。结果1、hTERT与HPV16/18E6蛋白表达情况免疫组化结果显示，hTERT蛋白表达于上皮细胞核与细胞质中；在慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、鳞癌及腺癌组中hTERT蛋白阳性率依次为17.65%、31.43%、69.57%、72.00%、78.22%、70.59%；各组之间差异具有显著性（P＜0.05)。由宫颈炎至宫颈鳞癌，其阳性率随宫颈病变严重程度增加呈上升趋势，且具有正相关关系(P＜0.05)。HPV16/18E6蛋白表达于上皮细胞胞浆中；HPV16/18E6蛋白在上述各组中的阳性率依次为11.76%、25.71%、47.83%、44.00%、60.40%、76.47%。各组间均存在显著差异（P＜0.05)；由宫颈炎至宫颈鳞癌，其阳性率与宫颈病变严重程度呈正相关关系（P＜0.05)。2、hTERT和HPV16/18E6蛋白的关系hTERT与HPV16/18E6蛋白均为阴性者70例，均为阳性者88例，hTERT阳性而HPV16/18E6蛋白阴性者56例，hTERT阴性而HPV16/18E6蛋白阳性者21例。两者具有正相关关系（P＜0.05）。3、hTERC基因扩增情况112例宫颈组织经FISH检测，杂交成功率为89.29%（100/112）。正常细胞的绿色信号即着丝粒对照探针与红色信号即hTERC基因均≤2个；异常细胞的红色信号＞2个。在慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、鳞癌及腺癌组中，hTERC基因扩增阳性率依次为：0.00%、13.64%、73.33%、83.33%、100%、100%，差异具有显著性（P＜0.05）；由宫颈炎至鳞癌，其阳性率随病变严重程度增加而增加，呈正相关关系（P＜0.05）。在慢性宫颈炎组中绿色信号（对照探针）与红色信号（hTERC探针）之比主要表现为2:2，CIN组中2:3基因扩增模式逐渐增加；宫颈鳞癌及腺癌组中的hTERC基因扩增模式较为复杂：绿红信号之比多为2:3、3:3、3:4等，红色信号甚至融合成簇。4、hTERC基因扩增与hTERT或HPV16/18E6蛋白的关系hTERC基因扩增与hTERT蛋白表达呈正相关关系（P＜0.05）；且与HPV16/18E6蛋白表达亦具有正相关性（P＜0.05）。结论hTERT及HPV16/18E6蛋白表达，以及hTERC基因扩增均随宫颈CIN的升级而逐渐活跃，可能是宫颈癌的早期事件，可作为宫颈癌前病变预后评估的预测指标。